[发明专利]紫斑牡丹IKU2基因制备方法有效

专利信息
申请号: 201810989478.X 申请日: 2018-08-28
公开(公告)号: CN109136218B 公开(公告)日: 2021-05-11
发明(设计)人: 丁健;韩平;阮成江;闫蕊;刘凌悦;吴波;董旭 申请(专利权)人: 大连民族大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;A01H5/10;A01H6/00
代理公司: 大连智高专利事务所(特殊普通合伙) 21235 代理人: 张钦;马庆朝
地址: 116600 辽宁省*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要: 发明涉及紫斑牡丹IKU2基因制备方法,属于生物工程技术领域。该基因的制备方法如下:(1)紫斑牡丹种子总RNA的提取,(2)cDNA第一链的合成,(3)紫斑牡丹IKU2基因保守区的扩增,(4)PCR扩增产物的回收纯化,(5)连接目的片段与克隆载体pMD 19‑T,(6)大肠杆菌DH5α菌株感受态细胞的制备,(7)连接产物的转化,(8)重组质粒的提取,(9)测序。本发明从紫斑牡丹种子不同发育时期的转录组文库中筛选得到调控种子大小的基因IKU2,为通过基因工程技术改良紫斑牡丹种子产量提供分子依据。
搜索关键词: 紫斑 牡丹 iku2 基因 制备 方法
【主权项】:
1.紫斑牡丹IKU2基因制备方法,其特征在于,具体步骤如下:步骤1、紫斑牡丹种子总RNA的提取;步骤2、cDNA第一链的合成;步骤3、紫斑牡丹IKU2基因保守区的扩增;步骤4、PCR扩增产物的回收纯化;步骤5、连接目的片段与克隆载体pMD 19‑T;步骤6、大肠杆菌DH5α菌株感受态细胞的制备;步骤7、连接产物的转化;步骤8、重组质粒的提取;步骤9、测序;将PCR检测后的质粒送往测序,对测序结果进行分析。
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