[发明专利]一种具有核酸洗脱功能的反转录PCR反应液和核酸提取方法在审
| 申请号： | 201811000328.8 | 申请日： | 2018-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN109055490A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 高利飞;肖李亚;秦明明;高歌;胡伟锋;杜美;李振红;付光宇;吴学炜;苗拥军 | 申请（专利权）人： | 郑州安图生物工程股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 郑州异开专利事务所(普通合伙) 41114 | 代理人： | 王霞 |
| 地址： | 450016 河南省郑州*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种具有核酸洗脱功能的反转录PCR反应液，其组分包括两种方案：其一包括双功能聚合酶，dNTPs，引物，探针，氯化锰或醋酸锰，Bicine/KOH，醋酸钾和甘油；其二包括耐热反转录酶mlv，dNTPs，引物，探针，KCl和Tris‑HCl；pH≥8.0。本发明配制了一种具有核酸洗脱功能的反转录PCR反应液，该反应液可耐受50‑95℃高温，采用该反转录PCR反应液替代了原经典检测方法中的PCR反应液和洗脱液，即将原PCR反应液和洗脱液合成为一个试剂‑‑‑反转录PCR反应液，同时可将洗脱步骤与后续PCR体系构建步骤合并，简化了一个步骤，该步骤的缩减对于自动化尤其是核酸POCT的实现非常关键。 | ||
| 搜索关键词： | 反转录PCR 核酸洗脱 洗脱液 探针 引物 步骤合并 反转录酶 核酸提取 甘油 醋酸钾 醋酸锰 聚合酶 氯化锰 双功能 核酸 耐热 构建 耐受 洗脱 配制 自动化 检测 替代 | ||
【主权项】：
1.一种具有核酸洗脱功能的反转录PCR反应液，其特征在于：包括以下组分：2‑100U双功能聚合酶，50‑400μM dNTPs，50‑400nM引物，20‑400mM探针，2‑10mM 氯化锰或醋酸锰，10‑100mM Bicine/KOH，20‑200mM醋酸钾，5‑10%甘油；其pH≥8.0。
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