[发明专利]一种双重固定化酶及其制备方法和应用

摘要

本发明属于固定化酶领域，公开了一种利用原位自由基聚合技术和碳纳米材料对酶进行双重固化的方法。该方法首先将碳纳米材料分散于磷酸盐缓冲溶液中得到碳纳米管分散液；再配制酶溶液，采用原位自由基聚合技术对酶分子进行修饰保护，得到酶纳米胶囊溶液；然后向碳纳米材料分散液中添加酶纳米胶囊溶液，混匀后静置；最后将混合液分离，洗涤，得到的沉淀即为双重固定化酶。这种双固定化酶体系以酶纳米胶囊为基本单元，与传统的固定化酶相比，酶分子表面修饰了一层聚合物层，因而极大的提高了酶分子的稳定性。本发明得到的双重固定化酶保留了较高的酶活力，且具有比游离酶和传统固定化酶更高的环境稳定性和重复使用性能。

主权项

1.一种双重固定化酶的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将碳纳米材料均匀分散于pH＝6～9的磷酸盐缓冲溶液中，得到碳纳米材料分散液；(2)将酶加入到pH＝6～9的磷酸盐缓冲液中形成酶溶液，向酶溶液中添加修饰剂，混合均匀并发生酶修饰反应，反应结束后再向其中添加单体、交联剂，然后再在无氧条件下添加引发剂和催化剂，引发原位聚合反应，反应结束后将所得反应液纯化即得到酶纳米胶囊溶液；(3)向步骤(1)中的碳纳米材料分散液中添加步骤(2)制备的酶纳米胶囊溶液，混匀后放入冰箱中静置，最后将混合液分离、洗涤，得到的沉淀即为双重固定化酶。