[发明专利]一种重塑复合生物羊膜的制备方法

摘要

本发明涉及医用材料制备技术领域，具体涉及一种重塑复合生物羊膜的制备方法。本发明以活性干酵母为原料得到蛋白酶，将酶解液、亚麻油酸剪切，同时添加抗坏血酸得到生物肽氧化剂，原花青素具有非常强的体内活性，能保护人体细胞组织免受自由基的氧化损伤，还具有加强和保护人体活性组织、稳定细胞膜以及抗酶活性等生物特性，本发明采用瓜尔胶与羊膜组合，羊膜中的活性蛋白的巯基受到瓜尔胶的物理屏障的保护，减少了活性基团的氧化，瓜尔胶的流变性能使不可溶的羊膜胶原成分长期地悬浮，瓜尔胶有利于羊膜低温粉碎和常温保存，具有广阔的应用前景。

主权项

1.一种重塑复合生物羊膜的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）取胎盘置于无菌工作台，将羊膜连同绒毛膜自胎盘上钝性分离后用生理盐水清洗血渍，得到洁净的羊膜，再用庆大霉素洗涤后放入DMEM培养基中培养4～5天，培养结束后冰冻储存，得到预处理的羊膜，备用；（2）将活性干酵母加水配制成酵母乳，用柠檬酸钠溶液调节酵母乳的pH，加热升温，加入酵母乳质量0.5%的混合蛋白酶，酶解得到酶解液；（3）按重量份数计，将40～50份上述酶解液、20～25亚麻油酸混合置于高速剪切机中，同时添加4～5份抗坏血酸，剪切乳化20～25min，得到混合乳液，将混合乳液放入旋蒸仪中，旋蒸10～15min，取下旋蒸瓶置于真空干燥箱中干燥，得到生物肽氧化剂；（4）取葡萄籽置于蒸馏水中，进行超声波破碎提取，再转移至离心分离机中，离心后用微孔滤膜器过滤，去除滤渣，得到滤液，将滤液放入冷冻干燥机中冻干，得到葡萄籽冻干提取物；（5）将瓜尔胶溶解于柠檬酸/柠檬酸钠缓冲溶液中，制得瓜尔胶溶液，将预处理的羊膜置于瓜尔胶溶液中，随后将瓜尔胶溶液、生物肽氧化剂、葡萄籽干提取物混合，置于球磨机中进行磨碎处理3～4h，球磨完毕后在冰水浴下过200目筛，得到过滤液，将过滤液用流延设备制成生物羊膜，流延过程中用高能电子束辐照。