[发明专利]一种微量DNA样品高通量测序文库的构建技术有效
| 申请号： | 201811025369.2 | 申请日： | 2018-09-04 |
| 公开（公告）号： | CN109023537B | 公开（公告）日： | 2021-10-08 |
| 发明（设计）人： | 赵小东;康亚妮;胡丛霞;徐伟 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 崔佳佳;马莉华 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种微量DNA样品高通量测序文库的构建技术。具体地，本发明方法包括步骤：(a)提供DNA片段和辅助核酸片段；(b)向DNA片段和辅助核酸片段两端添加接头；(c)用特异性抗体捕获、富集末端带有接头的DNA片段和辅助核酸片段；(d)用特异性酶去除所述辅助核酸片段；(e)用特异性引物对所述步骤(c)中捕获、富集的DNA片段和辅助核酸片段进行扩增，从而获得扩增产物。本发明方法更适用于少量来源的微量样品的文库构建；文库质量好，无污染；成本较低，具有较高的普遍适用性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 微量 dna 样品 通量 序文 构建 技术 | ||
【主权项】：
1.一种微量DNA样品高通量测序文库的构建方法，其特征在于，包括步骤：(a)提供第一混合物，所述第一混合物包括DNA片段和辅助核酸片段，所述DNA片段包括来源于细胞基因组DNA；(b)向所述第一混合物中的DNA片段和辅助核酸片段两端添加接头，从而得到含末端带有接头的DNA片段和辅助核酸片段的第二混合物；(c)用特异性抗体捕获富集所述的第二混合物中的末端带有接头的DNA片段和辅助核酸片段；(d)任选地用特异性酶去除所述辅助核酸片段；(e)用特异性引物对上一步骤中经捕获富集的DNA片段和辅助核酸片段进行扩增，从而获得含扩增产物的第三混合物；和(f)任选地，用特异性针对所述辅助核酸片段的核酸酶对所述第三混合物进行处理，从而消化所述辅助核酸片段，从而获得含有富集所述DNA片段的扩增产物的第四混合物。
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