[发明专利]一种巧克力饼干中致病菌的量子点荧光检测方法

摘要

本发明涉及一种巧克力饼干中致病菌的量子点荧光检测方法。本发明首先将致病菌的抗体嫁接于纳米磁珠上制备免疫磁珠；然后将适配体与量子点进行交联制备得量子点‑适配体交联物；将巧克力饼干用乙腈‑水混合液提取后制备得到巧克力饼干样品溶液；最后将免疫磁珠、量子点‑适配体交联物以及巧克力饼干样品溶液混合后，经孵育，磁分离，PBS溶液洗涤后用激光诱导荧光仪检测荧光值测量致病菌的浓度。本发明的检测方法结合了量子点的优势，巧妙地避免了对于细菌表面抗原位点的竞争性结合，提高多种目标检测灵敏度和速度、降低噪音、减少样本用量，能降低检测费用。

主权项

1.一种巧克力饼干中致病菌的量子点荧光检测方法，其特征在于，包括以下步骤： （1）将纳米磁珠用PBS缓冲液洗涤3次后，加入到碳化的二亚胺盐酸盐的PBS溶液中，超声分散均匀后加入抗体以及多肽后，室温下50‑100rpm/min条件下震荡1‑2小时后磁分离后得到含有抗体的磁珠，并用PBS溶液洗涤2‑3次后，将含有抗体的磁珠均匀分散于PBS溶液中制备免疫磁珠；（2）将量子点与适配体混合后，用PBS缓冲液定容后，在室温下，50‑100rpm/min条件下孵育30min后，得量子点‑适配体交联物，并储存于４℃冰箱保存备用；（3）将5g的巧克力饼干与15‑20mL的25‑40的%乙腈‑水混合液混合后，35‑50℃条件下超声提取20‑30min后离心，取上清液浓缩后，利用PBS缓冲液将浓缩液稀释到10mL后制备得到巧克力饼干样品溶液；（4）将免疫磁珠、量子点‑适配体交联物以及巧克力饼干样品溶液混合后，在室温下震荡2‑3小时后磁分离沉淀后，并用PBS溶液洗涤沉淀2‑3次后，将沉淀均匀分散于PBS溶液后，取300μL用激光诱导荧光仪检测荧光值。