[发明专利]一种超低温脱除建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的方法有效
| 申请号： | 201811063504.2 | 申请日： | 2018-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN109042331B | 公开（公告）日： | 2022-01-28 |
| 发明（设计）人： | 王仁睿;李杰 | 申请（专利权）人： | 西南科技大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 夏艳 |
| 地址： | 621000 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种脱除建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的方法，包括以下步骤：以感染建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的蝴蝶兰组培苗为对象，在体视显微镜下取茎尖；茎尖放入在预培养基进预培养；用加载液加载茎尖；用冰冻保护液处理茎尖；将冰冻保护液处理后的茎尖投入液氮中进行超低温处理；将超低温处理后的茎尖放入卸载液进行卸载；处理完的茎尖放入再生培养基，再转入正常光照下进行培养；3个月后，茎尖顺利成苗。本发明能够提高茎尖成活率和再生率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 超低温 脱除 建兰 花叶 病毒 环斑 方法 | ||
【主权项】：
1.一种脱除建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、以感染建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的蝴蝶兰组培苗为对象，在超净工作台的条件下，在体视显微镜下取1.0‑1.5cm大小的茎尖；茎尖放入在预培养基进预培养；步骤2、在室温条件下用加载液加载茎尖；步骤3、0℃条件下用PVS2玻璃化溶液处理茎尖，处理完毕后，用移液枪吸取PVS2溶液在铝箔纸上制作小滴，再将茎尖逐个放进小滴，用镊子将携带茎尖的铝箔纸夹住，投入液氮中进行超低温处理；步骤4、夹起超低温处理后的茎尖，放入卸载液进行卸载；处理完的茎尖放入再生培养基，暗培养7天，再转入正常光照下进行培养；3个月后，茎尖顺利成苗。
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