[发明专利]检测致痫大鼠海马组织谷氨酸及r-氨基丁酸含量的方法

摘要

本发明属于化学分析领域，提供了检测致痫大鼠海马组织谷氨酸及r‑氨基丁酸含量的方法，取戊四唑致痫的大鼠海马组织，冰上匀浆，离心取上清液进行衍生处理，然后进行高效液相色谱检测谷氨酸及r‑氨基丁酸，色谱条件为：采用反向C18柱，流动相包括流动相A和流动相B，流动相A为40‑60mmol/L的乙酸钠溶液和四氢呋喃，流动相B为乙腈，采用梯度洗脱。本发明的检测方法步骤简单，结果精确，检测快速。

主权项

1.检测致痫大鼠海马组织谷氨酸及r‑氨基丁酸含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)致痫大鼠模型的建立：取SD大鼠，用剂量为80mg/kg的戊四唑进行皮下注射，观察大鼠行为，根据Racine分级标准，选择IV‑V级致痫大鼠作为致痫大鼠模型；(2)将步骤(1)中得到的所述致痫大鼠达到癫痫发作级别后30min时断头取海马组织，称取海马组织，冰上匀浆，取海马组织匀浆加入50vol％的甲醇溶液，按照每100mg加入1mL甲醇溶液计算，‑4℃,12000rpm离心20‑30min，取上清与乙腈1:1混合后，‑4℃,12000rpm离心20‑30min得到的上清液为样品，将样品进行衍生处理；(3)衍生后的样品通过高效液相色谱进行检测，测定样品中的谷氨酸及r‑氨基丁酸含量，色谱条件如下：色谱柱采用反向C18色谱柱；流速：1.0mL/min；柱温：30‑35℃；检测波长：265nm；进样量：20uL；流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为40‑60mmol/L乙酸钠溶液和四氢呋喃，二者体积比为99:1，所述乙酸钠溶液用冰醋酸调节pH至4.8，所述流动相B为乙腈；采用如下梯度洗脱程序：