[发明专利]一种胚胎生产冷冻工艺

摘要

本发明涉及胚胎移植的技术领域，特别是涉及一种胚胎生产冷冻工艺，其可以提高胚胎的冷冻保存效果，并且可以提高解冻后再移植时胚胎的活性；包括以下步骤：(1)选择供体母羊和供体公羊；(2)供体公羊精液采集；(3)供体母羊超数排卵；(4)输精；(5)胚胎采集；(6)胚胎鉴定；(7)配制冷冻所需溶液；(8)冷冻前胚胎前处理；(9)胚胎装管；(10)冷冻；(11)保存。

主权项

1.一种胚胎生产冷冻工艺，其特征在于，包括以下步骤：(1)选择供体母羊和供体公羊：选择具备有优良的遗传特性和较高的育种价值，无病，健康状况良好，膘情适中，生殖系统机能正常的供体母羊和供体公羊，并且供体母羊选择2‑5胎的母羊，供体公羊选择1.5‑6岁的公羊；(2)供体公羊精液采集：对选择出的供体公羊精液进行采集，并鉴定精液的质量，合格的精液按照合适的稀释比例进行稀释，以备输精使用；(3)供体母羊超数排卵：体内刺激供体母羊使其超数排卵；(4)输精：输精前供体母羊需空腹禁食12h，采用腹腔镜寻找到供体母羊的子宫角，采用装有精液的输精枪在两组子宫角内注入适量的精液；(5)胚胎采集：在受精后2‑3天时或5‑6天时，利用冲卵液进行冲胚，从超排供体母羊体内将胚胎冲出，并收集在器皿中；(6)胚胎鉴定：胚胎收集后，立即镜检鉴定胚胎质量，并对胚胎进行胚胎等级鉴定，根据胚胎质量与品种档案进行分组保存；(7)配制冷冻所需溶液：配制冷冻胚胎所需要的预处理液和冷冻溶液；(8)冷冻前胚胎前处理：将质量良好的胚胎依次放入预处理液和冷冻液中分别平衡5min；(9)胚胎装管：在10min内将胚胎全部装入细管中，每只细管装入3‑5枚胚胎，用细管塞封口，并将胚胎记录标记在细管塞上；(10)冷冻：将装入胚胎后的细管放入冷冻仪中，采用慢速降温或快速降温的方法使胚胎冷却至‑35℃；(11)保存：在胚胎冷却至‑35℃时将细管由冷冻仪中取出并投入液氮中冷冻保存，每周补充液氮，每年更换液氮。