[发明专利]一种山茶属植物高效体细胞胚发生和植株再生的方法有效
申请号: | 201811088233.6 | 申请日: | 2018-09-18 |
公开(公告)号: | CN108901856B | 公开(公告)日: | 2019-12-17 |
发明(设计)人: | 吴华玲;于波;姜晓辉;方开星;李红建;秦丹丹;潘晨东 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院茶叶研究所;广东省农业科学院环境园艺研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 11350 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 510640 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种山茶属植物高效体细胞胚发生和植株再生的方法,将山茶属植物茶树、油茶或红山茶的组培苗切除3/4叶片,以带1/4叶片的茎段作为外植体,接种到体细胞胚诱导培养基上,在24~26℃、光照下培养,茎节及叶柄处形成体细胞胚;选取体细胞胚切成1~5mm厚的切片,将切片平铺至体细胞胚增殖培养基上,在24~26℃、光照下培养,可形成新的体细胞胚;将体细胞胚转移至植株再生培养基上,在24~26℃、光照下培养,可由体细胞胚再生出小植株。本发明以山茶属植物幼嫩茎段为外植体,建立了高效的体细胞胚发生和植株再生体系,可有效提高山茶属植物组培繁殖效率,从而为茶树、油茶和茶花等作物的种苗生产与基因工程改良等提供了技术支持。 | ||
搜索关键词: | 山茶属植物 体细胞胚 体细胞胚发生 光照 植株再生 外植体 油茶 茶树 切片 叶片 植株再生培养基 叶柄 基因工程改良 体细胞胚诱导 体细胞胚再生 植株再生体系 增殖培养基 技术支持 幼嫩茎段 种苗生产 组培繁殖 培养基 红山茶 小植株 组培苗 茶花 茎段 茎节 平铺 接种 切除 | ||
【主权项】:
1.一种山茶属植物高效体细胞胚发生和植株再生的方法,其特征在于,包括如下步骤:/nS1、体细胞胚诱导:从保存培养基上,选取茶树、油茶或红山茶组培苗,切除3/4叶片,以带1/4叶片的茎段作为外植体,接种到体细胞胚诱导培养基上,在24~26℃、光照条件下培养8~12周,茎节及叶柄处形成体细胞胚;所述保存培养基以MS培养基为基本培养基,并添加蔗糖20~40g/L和琼脂8g/L,pH为5.8~6.0;所述体细胞诱导培养基以MS培养基为基本培养基,并添加6-苄基氨基腺嘌呤(6-BA)1.0~2.0mg/L、蔗糖20~40g/L和琼脂8g/L,pH为5.8~6.0;/nS2、体细胞胚增殖:选取步骤S1中形成的体细胞胚,切片,将切片平铺至体细胞胚增殖培养基上,在24~26℃、光照条件下培养8周,在切片周边及表面形成新的体细胞胚;所述体细胞胚增殖培养基以MS培养基为基本培养基,添加噻苯隆(TDZ)0~0.1mg/L、蔗糖20~40g/L和琼脂8g/L,pH为5.8~6.0;/nS3、植株再生:选取步骤S2培养得到的体细胞胚转移至植株再生培养基上,在24~26℃、光照条件下培养8~12周,由体细胞胚再生出完整小植株;所述植株再生培养基以1/4MS培养基为基本培养基,并添加蔗糖20~40g/L和琼脂8g/L,pH为5.8~6.0。/n
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