[发明专利]一种提取蜜环菌总DNA的试剂及其应用在审
| 申请号： | 201811099996.0 | 申请日： | 2018-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN108998448A | 公开（公告）日： | 2018-12-14 |
| 发明（设计）人： | 王泽辉;张煜隆;刘艳玲;李晶;王安南;林兴生;罗海凌;林占熺 | 申请（专利权）人： | 福建农林大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350002 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明提供一种提取蜜环菌总DNA的试剂及其应用，可从50 mg左右其菌丝体和子实体样品中，经过破碎裂解、DNA吸附、漂洗、洗脱等步骤，快速高效的提取总DNA，针对新鲜的干样品，同样也可提取到适用于ITS鉴定等分子生物学实验的总DNA。进一步的实验证明，该方法也可以在灵芝、金针菇、香菇等食药用菌上应用。本方法单个样品提取时间缩短至15 min，且所提取的DNA完整性好、纯度高，可直接用于PCR、Real‑Time PCR、分子标记等下游分子生物学试验。 | ||
| 搜索关键词： | 总DNA 蜜环菌 应用 分子生物学实验 分子生物学试验 提取总DNA 单个样品 分子标记 时间缩短 食药用菌 漂洗 金针菇 菌丝体 子实体 灵芝 裂解 洗脱 破碎 香菇 新鲜 | ||
【主权项】：
1.一种提取蜜环菌总DNA试剂，其特征在于，其试剂包括平衡液、裂解液、洗涤液、洗脱液，其中：（1）平衡液包含以下成分：3% Na2SiO3·9H2O，2% KOH；（2）裂解液包含以下成分：5.0M盐酸胍，30%异丙醇和1.5%PVP K30；（3）洗涤液包含以下成分：20 mM NaCl，20 mM Tris‑HCl，85%乙醇，pH 7.5；（4）洗脱液包含以下成分：10 mM Tris‑HCl，pH 8.5。
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