[发明专利]一种CD40联合PD-L1及细胞因子扩增PBMC的方法有效
申请号: | 201811107312.7 | 申请日: | 2018-09-21 |
公开(公告)号: | CN109251891B | 公开(公告)日: | 2021-10-22 |
发明(设计)人: | 古彦铮;张学光;黄子逸;刘翠平 | 申请(专利权)人: | 苏州大学附属第一医院 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078 |
代理公司: | 北京知果之信知识产权代理有限公司 11541 | 代理人: | 唐海力;韩来兵 |
地址: | 215007 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: |
本发明公开了一种CD40联合PD‑L1及细胞因子扩增PBMC的方法,步骤如下:1)取正常人外周血,与PBS混合稀释后进行Ficoll密度梯度离心;2)离心结束后,得到4层液体;用移液管吸取中间云雾层细胞,用10倍体积的PBS洗涤离心,得到PBMC;3)将PBMC细胞用RMPI1640完全培养基配成细胞悬液,转入6孔板和24孔板里,然后于各组细胞培养液中加入相应细胞因子液:将孔板放到CO |
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搜索关键词: | 一种 cd40 联合 pd l1 细胞因子 扩增 pbmc 方法 | ||
【主权项】:
1.一种CD40联合PD‑L及细胞因子扩增PBMC的方法,其特征在于,包括如下步骤:1)取正常人外周血,与PBS混合稀释后进行Ficoll密度梯度离心;2)离心结束后,得到4层液体;用移液管吸取中间云雾层细胞,然后用10倍体积的PBS洗涤离心,最后得到PBMC;3)将PBMC细胞用RMPI1640完全培养基配成细胞悬液,然后转入6孔板和24孔板里,然后于各组细胞培养液中加入相应细胞因子液:然后将孔板放到CO2培养箱内培养;4)视细胞状态每隔2~3天补加一次细胞因子液。
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