[发明专利]一种转移因子口服溶液中的核糖核酸定量检测方法

摘要

本发明公开了一种转移因子口服溶液中的核糖核酸定量检测方法，属于多组分生化药物质量研究领域。方法包括：1)配制转移因子口服溶液核糖核酸含量测定供试品溶液；2)构建核糖核酸的标准曲线方程；3)转移因子口服液中核糖核酸的检测；4)转移因子口服液中核苷酸类物质的含量计算。该方法经过科学系统的验证，其能够实现对转移因子口服溶液中核糖核酸进行准确定量，排除其他物质的干扰且相邻组分峰间分离度佳，重现性好，检测效率高；该方法能够克服现有技术中的不足，以便对转移因子口服溶液的生产实施有效的监督控制。

主权项

1.一种转移因子口服溶液中的核糖核酸定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：1)配制转移因子口服溶液核糖核酸含量测定供试品溶液采用蛇毒磷酸二酯酶对转移因子口服溶液进行酶解，获得转移因子口服溶液核糖核酸含量测定供试品溶液；2)构建核糖核酸的标准曲线方程以鸟嘌呤脱氧核苷酸为对照品，配制线性系列溶液，利用高效液相色谱法检测获得色谱图，以鸟嘌呤脱氧核苷酸浓度对其峰面积按最小二乘法进行线性回归，得到标准曲线方程及线性相关系数；其中，高效液相色谱检测条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱；以流动相A和流动相B进行梯度洗脱，其中：流动相A为甲醇；流动相B为pH值为3.55～3.65、浓度为0.1mol/L的磷酸二氢钾溶液；检测过程中：波长为210～320nm，进样量为1～50μL，流速为0.6～1.0mL/min，柱温为33～37℃；3)转移因子口服液中核糖核酸的检测精密量取步骤1)制得的转移因子口服溶液核糖核酸含量测定供试品溶液，利用高效液相色谱法在与步骤2)相同的色谱检测条件下获得色谱图，由相对保留时间定位核糖核酸基本组成物质即4种核苷酸和4种核苷的色谱峰；4)转移因子口服液中核苷酸类物质的含量计算根据步骤2)获得的标准曲线方程和步骤3)的色谱峰，从标准曲线方程中求出各待测物质的含量，乘以相应的相对校正因子并加和即得核糖核酸含量。