[发明专利]制备人脂肪干细胞培养液的方法及其在美容用品中的应用在审
| 申请号： | 201811128355.3 | 申请日： | 2018-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN109182264A | 公开（公告）日： | 2019-01-11 |
| 发明（设计）人： | 魏色东 | 申请（专利权）人： | 深圳市乔水生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;A61K8/99;A61Q19/10;A61Q19/02 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 肖宇扬;付静 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市福田区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种制备人脂肪干细胞培养液的方法及其应用，包括以下步骤：使用胰酶和胶原酶联合消化人源脂肪组织，待溶液分为三层，取下层，制得脂肪干细胞沉淀液；加入L‑DMEM完全培养基中终止消化并进行原代培养；对原代脂肪干细胞进行传代培养，该过程中提供O2分压为1～5％、CO2分压为5％的低氧气氛以及10～30mJ/cm2的紫外线照射，并加入1×10‑7mol/L胰岛素，获得脂肪干细胞培养物；将脂肪干细胞培养物液离心，过滤，除去脂肪干细胞，得到滤液即为所述脂肪干细胞培养液。通过该培养方法可促进脂肪干细胞旁分泌，得到的脂肪干细胞培养液中含有多种旁分泌组分，且含量非常高。该脂肪干细胞培养液可作为活性物质，添加到护肤美容产品中，使得护肤美容品具有美白、祛疤、抗皱等功效。 | ||
| 搜索关键词： | 脂肪干细胞 培养液 培养物 分压 分泌 制备 护肤美容品 完全培养基 紫外线照射 消化 传代培养 低氧气氛 护肤美容 活性物质 美容用品 原代培养 脂肪组织 胰岛素 沉淀液 胶原酶 抗皱 美白 人源 三层 下层 胰酶 过滤 应用 联合 | ||
【主权项】：
1.一种制备人脂肪干细胞培养液的方法，包括以下步骤：步骤a.使用0.25vol％胰酶和0.1vol％胶原酶联合消化人源脂肪组织，消化20分钟后，液面分为三层，上层为脂肪细胞层，中层为脂肪组织层，下层为含单个核细胞的液体，取下层液体，采用换液方式冲走溶液中的红细胞，制得脂肪干细胞沉淀液；步骤b.将所述脂肪干细胞沉淀液加入L‑DMEM完全培养基中终止消化并进行脂肪干细胞原代培养；步骤c.用0.25vol％胰酶和0.04％EDTA对原代脂肪干细胞进行消化传代，传代培养过程中提供O2分压为1～5％、CO2分压为5％的低氧气氛以及10～30mJ/cm2的低剂量紫外线照射，并在培养过程中加入1×10‑7mol/L胰岛素，获得脂肪干细胞培养物；步骤d.将所述脂肪干细胞培养物液离心，过滤，除去脂肪干细胞，得到滤液即为所述脂肪干细胞培养液。
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