[发明专利]一种热稳定性提高的L-天冬氨酸-α-脱羧酶有效
申请号: | 201811131112.5 | 申请日: | 2018-09-27 |
公开(公告)号: | CN109055346B | 公开(公告)日: | 2020-12-29 |
发明(设计)人: | 周哲敏;刘中美;刘宇峰;周丽;崔文璟;郭军玲;王超;薛岚 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/06;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种热稳定性提高的L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶,属于基因工程技术领域。本发明通过对来源于赤拟谷盗的L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶进行定点突变,获得K49R,G369A和K221R三个酶突变体,将突变体重组质粒转化至大肠杆菌BL21中,表达分离纯化后,催化底物L‑天冬氨酸生成β‑丙氨酸。在50℃处理温度下,K49R可以使热稳定性相较于野生酶提高14%,G369A可以使热稳定性相较于野生酶提高20%,K221R可以使热稳定性相较于野生酶提高23%。其中,K221R还可以使比酶活达到约320U/g,相较于野生酶酶活提高了23%。这一发现对于工业化制备β‑丙氨酸具有重要的研究价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 热稳定性 提高 天冬氨酸 脱羧酶 | ||
【主权项】:
1.一种热稳定性提高的L‑天冬氨酸‑α‑脱羧酶,其特征在于,具有SEQ ID NO.2‑4任一所示的氨基酸序列,或者,是在SEQ ID NO.1限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸得到的热稳定性提高的其他蛋白质。
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