[发明专利]一种RFF2细胞的构建方法在审
| 申请号： | 201811153252.2 | 申请日： | 2018-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN109136183A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 焦顺昌;张嵘;周子珊;解佳森;王海燕;李营营 | 申请（专利权）人： | 北京鼎成肽源生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;C12N1/38 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 张红 |
| 地址： | 100096 北京市昌平区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开提供了一种RFF2细胞的构建方法，属于生物技术领域。本发明公开用于构建一种攻防兼顾、具有特异性杀伤作用的特异性T细胞，即一种用于细胞免疫治疗的RFF2细胞，精准性好、杀伤率高。所述构建方法包括以下步骤：PBMC细胞负载致肿瘤突变的多肽，而后对负载多肽后的PBMC细胞进行多肽冲击；冲击后扩大培养，以得到FF细胞；以致肿瘤突变的多肽作为抗原直接刺激该FF细胞以筛选精准多肽；以精准多肽负载PBMC细胞，而后培养，并在培养过程中，用精准多肽进行多次冲击；冲击后继续培养，得到RFF细胞；用PD1等抗体对所得RFF细胞进行免疫抑制性信号分子体外封闭，以得到RFF2细胞。所述构建方法可用于细胞免疫治疗技术。 | ||
| 搜索关键词： | 多肽 细胞 构建 细胞免疫治疗 突变 肿瘤 特异性杀伤作用 生物技术领域 免疫抑制性 多次冲击 扩大培养 信号分子 抗原 抗体 可用 杀伤 体外 筛选 刺激 封闭 | ||
【主权项】：
1.一种RFF2细胞的构建方法，其特征在于，所述构建方法用于构建一种用于细胞免疫治疗的RFF2细胞，所述方法包括以下步骤：S1)PBMC细胞负载致肿瘤突变的多肽，而后对负载多肽后的PBMC细胞进行一次多肽冲击；S2)冲击后扩大培养，以得到FF细胞；S3)以致肿瘤突变的多肽作为抗原直接刺激所述FF细胞以筛选精准多肽；S4)以步骤S3筛选的精准多肽负载PBMC细胞，而后培养，并在培养过程中，以精准多肽进行多次多肽冲击；S5)冲击后继续培养，得到RFF细胞；S6)用单抗药对步骤S5所得RFF细胞进行免疫抑制性信号分子的封闭，以得到RFF2细胞，所述免疫抑制性信号分子包括：PD‑1、Tim‑3、LAG3、CTLA‑4、BTLA、VISTA、CD160、TIGIT、2B4(CD244)。
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