[发明专利]一种用于定量测定粪便中幽门螺杆菌抗原试剂的制备方法在审
| 申请号： | 201811158165.6 | 申请日： | 2018-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN109342722A | 公开（公告）日： | 2019-02-15 |
| 发明（设计）人： | 侯志波;张伟;温建超;翁琪墁 | 申请（专利权）人： | 深圳市鸿美诊断技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/531 |
| 代理公司： | 深圳市精英专利事务所 44242 | 代理人： | 龙丹丹 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市大鹏新区葵涌街*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于定量测定粪便中幽门螺杆菌抗原试剂的制备方法，包括制备R2试剂的步骤：S1、提取幽门螺杆菌抗原(尿素酶)蛋白，将尿素酶基因克隆到pGEX‑4T‑1质粒中，通过大肠杆菌发酵表达，经过亲和层析纯化得到重组幽门螺杆菌抗原(尿素酶)；S2、制备抗幽门螺杆菌抗原(尿素酶)多克隆抗体；S3、制备包被抗幽门螺杆菌抗原(尿素酶)多克隆抗体的乳胶颗粒；S4、分散于缓冲溶液得到R2试剂。该方法是乳胶增强免疫比浊法，制得的试剂是一种可直接通过粪便检测幽门螺杆菌的溶液，仅需粪便样品即可完成检测，取样方便，对人体无安全隐患，检测效率高、稳定性好，特异性强，不易受干扰。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 尿素酶 幽门螺杆菌抗原 抗原 抗幽门螺杆菌 多克隆抗体 定量测定 粪便 重组幽门螺杆菌 亲和层析纯化 大肠杆菌 尿素酶基因 幽门螺杆菌 安全隐患 粪便检测 粪便样品 缓冲溶液 乳胶颗粒 乳胶增强 特异性强 比浊法 检测 包被 取样 质粒 发酵 蛋白 克隆 | ||
【主权项】：
1.一种用于定量测定粪便中幽门螺杆菌抗原试剂的制备方法，其特征在于，包括制备R2试剂的步骤：S1、提取幽门螺杆菌抗原蛋白，将尿素酶基因克隆到质粒中，通过大肠杆菌发酵表达，得到重组幽门螺杆菌抗原；S2、制备抗幽门螺杆菌抗原多克隆抗体；S3、制备包被抗幽门螺杆菌抗原多克隆抗体的乳胶颗粒；S4、将包被抗幽门螺杆菌抗原多克隆抗体的乳胶颗粒与含有0.1％‑10％电解质、0.1％‑10％稳定剂、0.1％‑10％表面活性剂、0.1％‑5％防腐剂和1‑1000mmol/L的MES缓冲液混合，即得。
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