[发明专利]人GDNF基因在牛β-casein基因座定位整合的载体及其应用有效
| 申请号： | 201811160162.6 | 申请日： | 2018-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN109207521B | 公开（公告）日： | 2021-11-23 |
| 发明（设计）人： | 张学明;虞飞;丁海麦 | 申请（专利权）人： | 张学明 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/90;A01K67/027 |
| 代理公司： | 重庆乐泰知识产权代理事务所(普通合伙) 50221 | 代理人： | 付金星 |
| 地址： | 014000 内蒙古*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | 本发明提供了人GDNF基因在牛β‑casein基因座上定位整合的打靶载体和特异性断裂打靶位点序列的CRISPR/Cas9表达载体。打靶载体是基于同源重组原理设计的，包括正筛选基因，在正筛选基因的两端具有重组酶识别序列，所述重组酶识别序列的另一端分别与牛β‑casein基因的5′同源臂和3′同源臂相连，人GDNF cDNA基因位于5′同源臂下游；CRISPR/Cas9表达载体，用于特异性地断裂打靶位点序列，包括引导序列sgRNA、Cas9蛋白序列和CRISPR结构序列。本发明还提供了所述载体用于获得人GDNF cDNA基因在牛β‑casein基因座上定位整合的牛胎儿成纤维细胞的应用。 | ||
| 搜索关键词： | gdnf 基因 casein 定位 整合 载体 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.人GDNF基因在牛β‑casein基因座上定位整合载体，包含打靶载体和特异性断裂打靶位点序列的CRISPR/Cas9表达载体，其中，所述打靶载体是基于同源重组原理设计的，包括正筛选基因，在正筛选基因的两端具有重组酶识别序列，所述重组酶识别序列的另一端分别与牛β‑casein基因的5′同源臂和3′同源臂相连，人GDNF cDNA基因位于5′同源臂下游，所述CRISPR/Cas9表达载体，用于特异性地断裂打靶位点序列，包括引导序列sgRNA、Cas9蛋白序列和CRISPR结构序列。
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