[发明专利]沉积物中DNA的预处理方法有效
申请号: | 201811160620.6 | 申请日: | 2018-09-30 |
公开(公告)号: | CN109321562B | 公开(公告)日: | 2021-10-08 |
发明(设计)人: | 范俊韬;闫振广;郑欣;郭芬;王鹏远 | 申请(专利权)人: | 中国环境科学研究院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 李冉 |
地址: | 100000 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种沉积物中DNA的预处理方法,具体步骤如下:取5~10kg沉积物,加入4~6倍重量的水,搅拌混匀,沉降15~20min;(2)取上清5~10L,加入100~200g明矾,100~200g焦磷酸钠,搅拌混匀,沉降10~15min;(3)取上清3~6L,加入50~100g Tris,40~80g聚乙烯吡咯烷酮,23~47g NaCl,2~4g Triton X‑100,搅拌混匀,沉降15~20min;(4)取上清1.5~3L,提取DNA。本发明提供的一种大量沉积物中DNA的预处理方法,不仅能获得高纯度DNA,还能够准确反映物种的多样性。 | ||
搜索关键词: | 沉积物 dna 预处理 方法 | ||
【主权项】:
1.一种沉积物中DNA的预处理方法,其特征在于,具体步骤如下:(1)取5~10kg沉积物,加入4~6倍重量的水,搅拌混匀,沉降15~20min;(2)取上清5~10L,加入100~200g明矾,100~200g焦磷酸钠,搅拌混匀,沉降10~15min;(3)取上清3~6L,加入50~100g Tris,40~80g聚乙烯吡咯烷酮,23~47g NaCl,2~4g TritonX‑100,搅拌混匀,沉降15~20min;(4)取上清1.5~3L,经0.22um灭菌膜过滤,收集滤膜,将其剪碎置于无菌离心管中,加入无菌水,涡旋震荡,离心,取上清液,提取DNA。
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