[发明专利]一种利用海洋硅藻共栖细菌发酵制备遗忘性贝毒软骨藻酸的方法

摘要

本发明涉及海洋微生物发酵技术领域，解决了通过硅藻培养提取的方法制备软骨藻酸培养周期长、成本高的问题，公开了一种利用海洋硅藻共栖细菌发酵制备遗忘性贝毒软骨藻酸的方法。该制备方法为先进行菌株活化，然后接种到种子培养液中进行培养，再接种到发酵液中进行发酵得到遗忘性贝毒软骨藻酸发酵液，最后对菌株进行浸泡提取，纯化得到遗忘性贝毒软骨藻酸。本发明通过细菌发酵的方法制备软骨藻酸具有发酵时间短，成本低，代谢调控相对简单。

主权项

1.一种利用海洋硅藻共栖细菌发酵制备遗忘性贝毒软骨藻酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）菌株活化：将斜面菌种接种到摇瓶种子液培养基中，在30‑32℃下培养12‑15h，得到活化菌株种子液；2）种子液准备：向种子培养液中通入蒸汽加热，121‑123℃灭菌25‑35min，冷却至30‑31℃，采用火种接种法将活化菌株种子液接种到种子培养液中，通气搅拌，通气量为40‑50 L/min，搅拌速率为160‑180r/min，30‑33℃下恒温培养15‑18h，得到种子液；3）发酵：向发酵液中通入蒸汽加热，121‑123℃灭菌25‑35min，冷却至30‑31℃，将步骤2）得到的种子液接种到发酵液中，通气搅拌，通气量为40‑60L/min，搅拌转速140‑160r/min，30‑33℃下恒温培养48‑52h，得到遗忘性贝毒软骨藻酸发酵液；4）提取：将遗忘性贝毒软骨藻酸发酵液进行板框过滤得到菌体，加入甲醇溶液，静置10‑20min，过滤，得到一次提取液和过滤菌体；将过滤菌体加入甲醇溶液中，静置10‑20min，过滤，得到二次提取液和过滤菌体；将过滤菌体加入甲醇溶液中，静置10‑20min，过滤，得到三次提取液，将一次提取液、二次提取液和三次提取液合并，旋蒸浓缩，得到遗忘性贝毒软骨藻酸粗提物；5）纯化：将遗忘性贝毒软骨藻酸粗提物进行洗脱，收集遗忘性贝毒软骨藻酸组分，旋转蒸发，除去溶剂，得到白色粉末，即为遗忘性贝毒软骨藻酸。