[发明专利]一种鼠李糖乳杆菌噬菌体的快速定量检测方法有效
| 申请号： | 201811234775.X | 申请日： | 2018-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN109239343B | 公开（公告）日： | 2020-07-14 |
| 发明（设计）人： | 杨振泉;时秒;高璐;胡钦;饶胜其;郑香峰 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 薛海霞;董建林 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种鼠李糖乳杆菌噬菌体的快速定量检测方法。本发明将鼠李糖乳杆菌菌毛亚基SpaA特异性多克隆抗体与纳米磁珠偶联形成特异性免疫磁珠；利用鼠李糖乳杆菌活细胞对样品中的噬菌体颗粒进行吸附，离心、洗涤后重悬于缓冲液；应用免疫磁珠捕获鼠李糖乳杆菌‑噬菌体复合物、磁场分离、PBS洗涤后，以磁性玻碳电极作为工作电极，铅丝与饱和甘汞电极作为对电极和参比电极，测定样品和对照中的电阻值差异，对样品中噬菌体实现快速定量检测。本发明操作简便，无需培养、耗时短、便于推广使用，适合鼠李糖乳杆菌高密度发酵制备中环境和原材料中噬菌体的检测，便于快速确定污染来源和途径，采取综合防治措施。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 鼠李糖乳 杆菌 噬菌体 快速 定量 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种鼠李糖乳杆菌噬菌体的快速定量检测方法，包括如下步骤：1）鼠李糖乳杆菌菌毛亚基SpaA特异性多克隆抗体与纳米磁珠偶联，得到SpaA抗体偶联的纳米磁珠；2）鼠李糖乳杆菌特异性吸附样品中的噬菌体颗粒，得到鼠李糖乳杆菌‑噬菌体复合物；3）步骤1）制得的SpaA抗体偶联的纳米磁珠捕获与分离步骤2）制得的鼠李糖乳杆菌‑噬菌体复合物；4）免疫磁珠电化学传感器定量检测样品中的噬菌体含量。
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