[发明专利]一种筛选能应用于流式细胞术抗体的方法在审
| 申请号： | 201811242616.4 | 申请日： | 2018-10-24 |
| 公开（公告）号： | CN109517058A | 公开（公告）日： | 2019-03-26 |
| 发明（设计）人： | 鲁亮;雷坤;秦伏波;张永霞 | 申请（专利权）人： | 普健生物（武汉）科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/00 | 分类号： | C07K16/00;C12N15/70;C12N15/13;G01N15/14;G01N33/53 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 徐瑛;祝蓉蓉 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开一种筛选能应用于流式细胞术抗体的方法，包括以下步骤：(1)抗原表达及纯化，所述抗原包括免疫抗原、筛选抗原、流式筛选抗原；(2)小鼠免疫，筛选效价高的小鼠做细胞融合；(3)预实验处理，获取通透处理的细胞，所述细胞可表达MATX‑GFP‑His蛋白；(4)细胞融合和筛选；(5)亚克隆；(6)抗体生产。通过预实验设计确定二抗来源及其工作浓度，以简化操作，避免筛选过程中的背景干扰，减少工作量，提高工作效率，筛选周期短，适应于流式细胞术抗体的快速筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 筛选 流式细胞术 抗原 抗体 细胞融合 细胞 背景干扰 工作效率 抗体生产 抗原表达 快速筛选 免疫抗原 实验处理 实验设计 小鼠免疫 亚克隆 二抗 流式 通透 小鼠 效价 工作量 应用 蛋白 | ||
【主权项】：
1.一种筛选能应用于流式细胞术抗体的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)抗原表达及纯化，所述抗原包括免疫抗原、筛选抗原、流式筛选抗原；所述抗原含有MATX的cDNA基因序列，所述cDNA的基因序列如序列表SEQ ID NO.1所示；(2)小鼠免疫，筛选效价高的小鼠做细胞融合；(3)预实验处理，获取通透处理的细胞，所述细胞可表达MATX‑GFP‑His蛋白，所述MATX‑GFP‑His蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示；(4)细胞融合和筛选；(5)亚克隆；(6)抗体生产。
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