[发明专利]一种用于大肠杆菌裂解液澄清的方法

摘要

本发明公开了一种用于大肠杆菌裂解液澄清的方法，通过以正硅酸乙酯、Fe3O4磁性纳米粒子为原料，先制备出表面包裹一层Fe3O4磁性纳米粒子的二氧化硅纳米粒，然后再在表面进行接枝改性，将核酸酶固定在表面，制的一种特殊的固定化核酸酶。相比于市面上常见的磁珠式核酸酶，利用这种固定化核酸酶澄清大肠杆菌裂解液，水解能力更强，水解后的大肠杆菌裂解液粘度大大降低，能够稳定性好，储存时间可达2年以上；活力高，反复使用活性扔保持较高水品。

主权项

1.一种用于大肠杆菌裂解液澄清的方法，其特征在于，采用固定化核酸酶水解大肠杆菌裂解液中的核酸；其中，所述固定化核酸酶的制备方法为：A1、取正硅酸乙酯、蒸馏水和无水乙醇混匀，且体积比为1～2.5:1:1，得混合液Ⅰ；A2、取Fe3O4磁性纳米粒子加至混合液Ⅰ中，加入质量分数为26％的氨水催化，在磁场中搅拌8～12h，得混合液Ⅱ；A3、取混合液Ⅱ于磁力架上静置10min，过滤取滤渣用超纯水反复洗涤至洗涤液为中性，在40～60℃条件下真空干燥6～10h，得磁性二氧化硅纳米粒；A4、取3‑氨丙基甲基二乙氧基硅烷的乙醇溶液加至磁性二氧化硅纳米粒中，同时加入偶氮二异丁腈，反复搅拌2～4h，静置3～6h，得表面改性接枝处理的磁性二氧化硅纳米粒溶液，即溶液Ⅰ；A5、在溶液Ⅰ中加入核酸酶，在37℃下超声波振荡反应10～15min，再过滤取沉淀物在45～55℃下烘干，冷却得固定化核酸酶。