[发明专利]一种高通量玉米叶片DNA提取的方法在审
| 申请号： | 201811251487.5 | 申请日： | 2018-10-25 |
| 公开（公告）号： | CN109371009A | 公开（公告）日： | 2019-02-22 |
| 发明（设计）人： | 马丽;邹继军;应继锋;郑秀婷;卢东林;王涛;薄淼 | 申请（专利权）人： | 袁隆平农业高科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;陈征 |
| 地址： | 410001 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明涉及DNA的提取方法，具体公开了一种高通量玉米叶片DNA提取的方法。所述方法为将玉米叶片加入预处理液，研磨；吸出预处理液弃去，加入DNA提取液；混匀后水浴提取，将提取液离心，取上清液，加入异丙醇沉淀DNA，混匀，离心，弃去上清；加入酒精洗沉淀DNA，混匀，离心，弃去上清，即得。本发明所述方法无需使用液氮进行样本处理，且无需使用氯仿等有机溶剂，相对安全无毒；本发明通过加入预处理液，有效防止了玉米叶片在研磨过程中的氧化，并在预处理液和提取液中均加入了一定比例的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，可以去除酚类等杂质，确保所提DNA质量；所述方法可高度匹配移液工作站，实现高通量自动化。 | ||
| 搜索关键词： | 玉米叶片 预处理液 高通量 混匀 研磨 提取液 聚乙烯吡咯烷酮 移液工作站 异丙醇沉淀 高度匹配 取上清液 水浴提取 样本处理 有机溶剂 酒精洗 酚类 氯仿 吸出 液氮 去除 沉淀 无毒 自动化 安全 | ||
【主权项】：
1.一种高通量玉米叶片DNA提取的方法，其特征在于，包括：将玉米叶片加入预处理液，研磨；吸出预处理液弃去，加入DNA提取液；混匀后水浴提取，将提取液离心，取上清液，加入异丙醇沉淀DNA，混匀，离心，弃去上清；加入酒精洗沉淀DNA，混匀，离心，弃去上清，即得；其中，所述预处理液和所述DNA提取液含有0‑4％m/v PVP。
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