[发明专利]一种针对产苯唑西林酶OXA-48细菌的特异性检测方法

摘要

本发明涉及生化分析和耐药细菌检测技术领域，尤其涉及一种针对产苯唑西林酶OXA‑48细菌的特异性检测方法。本发明提供了利用等温滴定微量热仪记录碳青霉烯酶中D类苯唑西林酶OXA‑48在特定条件下催化碳青霉烯类底物时的实时热谱曲线，并根据该曲线是否具有“双相热谱曲线”特征，快速准确地判断待测细菌样品是否携带OXA‑48酶的信息，即待测细菌样品是否为产OXA‑48酶细菌。经实验证实，本检测方法具有良好的特异性和灵敏度，而且本方法操作简单快速，可在20分钟内准确获得样本检测结果，节省了检测时间，提高了检测效率。因此，本发明方法的推广应用可满足针对苯唑西林酶OXA‑48的医学研究及临床应用需要。

主权项

1.一种针对产苯唑西林酶OXA‑48细菌的特异性检测方法，其特征在于：所述检测方法包括下述步骤：(1)将待测细菌样品用包含100mM磷酸、20‑320mM氯离子，pH为7.5的缓冲液配制成浓度为OD600＝4‑20的细菌悬液，然后将该细菌悬液加入等温滴定微量热仪样品池中；(2)向滴定针中加入由上述相同缓冲液溶解配制的碳青霉烯类抗生素溶液；(3)将滴定针中的碳青霉烯类抗生素溶液加入等温滴定微量热仪样品池，检测温度为37℃，抗生素终浓度为20‑800μM，记录样品池中实时热量变化，直至热量变化回到基线，即所有碳青霉烯类抗生素被水解完全，得到实时热谱曲线；(4)根据所得到的实时热谱曲线是否具有“双相热谱曲线”特征，判断待测细菌样品是否携带OXA‑48酶的信息。