[发明专利]一种以凡士林柱为支撑的胚胎立体结构的荧光成像方法在审
| 申请号： | 201811260712.1 | 申请日： | 2018-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN109406471A | 公开（公告）日： | 2019-03-01 |
| 发明（设计）人： | 曹祖兵;张丹丹;童旭;王怡青;宁伟;齐昕;高迪;许腾腾;刘成雪;张运海 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人： | 沈尚林 |
| 地址： | 230000 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了以凡士林柱为支撑的胚胎立体结构的荧光成像方法，包括如下步骤：胚胎准备；DAPI染核；制备凡士林柱支撑柱及添加抗淬灭剂：首先，用凡士林在载玻片一侧方形区域的四角点四个柱，且四个凡士林柱所围成的面积要小于盖玻片的面积；在四个凡士林柱围成区域内的正中央滴加15μL抗淬灭剂；压片、封片；激光共聚焦显微镜扫描成像；将制备凡士林柱为支撑的载玻片分别在激光共聚焦显微镜的普通光和紫外光激发下观察猪第七天囊胚的立体结构。本发明的以凡士林柱为支撑保持胚胎立体结构的荧光成像技术，通过降低胚胎立体荧光成像时耗材使用的成本而代替商业化耗材依赖的成像技术，使胚胎立体成像技术的应用更加广泛。 | ||
| 搜索关键词： | 凡士林 胚胎 立体结构 激光共聚焦显微镜 荧光成像 支撑 淬灭剂 载玻片 耗材 制备 立体成像技术 荧光成像技术 紫外光激发 成像技术 方形区域 立体荧光 扫描成像 盖玻片 正中央 柱支撑 滴加 封片 囊胚 压片 柱围 成像 观察 应用 | ||
【主权项】：
1.一种以凡士林柱为支撑的胚胎立体结构的荧光成像方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)胚胎准备；(2)DAPI染核；(3)制备凡士林柱支撑柱及添加抗淬灭剂：首先，用凡士林在载玻片一侧方形区域的四角点四个柱，且四个凡士林柱所围成的面积要小于盖玻片的面积，所点的凡士林柱的高度为2㎜；然后，在四个凡士林柱围成区域内的正中央滴加15μL抗淬灭剂；(4)压片、封片；(5)激光共聚焦显微镜扫描成像；将制备凡士林柱为支撑的载玻片分别在激光共聚焦显微镜的普通光和紫外光激发下观察猪第七天囊胚的立体结构。
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