[发明专利]一种单分子蛋白的检测方法有效
申请号: | 201811268075.2 | 申请日: | 2018-10-29 |
公开(公告)号: | CN109142756B | 公开(公告)日: | 2022-02-08 |
发明(设计)人: | 夏江;宋小慧;位玉玲 | 申请(专利权)人: | 领航基因科技(杭州)有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N21/64 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 刘伟;赵青朵 |
地址: | 310000 浙江省杭州市江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明属于蛋白检测领域,公开了一种单分子蛋白的检测方法,待测蛋白与靶蛋白抗体混合生成待测蛋白与靶蛋白抗体复合物,与经标记物标记的检测抗体混合解离收集待测蛋白和检测抗体的复合物;所述标记物为荧光素标记物或酶标记物;将所述待测蛋白和检测抗体的复合物直接分散于微流控芯片或先将所述待测蛋白和检测抗体的复合物与酶标记物对应的底物混合反应然后将反应液分散于微流控芯片中;利用激光共聚焦检测系统进行荧光信号扫描,单分子计数。本发明所述检测方法可以快速对单分子蛋白进行定量检测,检测灵敏度高,适用于对表达丰度过低的蛋白。本发明所述检测方法操作方便,检测结果准确、CV值偏差小;而且通量高,可一次性检测多个样本。 | ||
搜索关键词: | 一种 分子 蛋白 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.一种单分子蛋白的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)待测蛋白与靶蛋白抗体混合,生成待测蛋白与靶蛋白抗体复合物;(2)将待测蛋白与靶蛋白抗体复合物与经标记物标记的检测抗体混合,解离收集待测蛋白和检测抗体的复合物;所述标记物为荧光素标记物或酶标记物;(3)当标记物为荧光素标记物时,将所述待测蛋白和检测抗体的复合物直接分散于微流控芯片;当标记物为酶标记物时,先将所述待测蛋白和检测抗体的复合物与酶标记物对应的底物混合反应,然后将反应液分散于微流控芯片中;(4)利用激光共聚焦检测系统对所述微流控芯片内部的液滴进行荧光信号扫描,单分子计数。
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