[发明专利]蛋白质的修饰与分离纯化以及巯基蛋白酶的酶活调控方法

摘要

本发明公开了一种蛋白质的修饰与分离纯化以及巯基蛋白酶的酶活调控方法，在蛋白质巯基上接上聚合物高分子，利用聚合物NIPAM在32℃的临界温度特性，在温度超过32℃时蛋白‑聚合物从溶液中析出，此时再将蛋白‑聚合物离心沉淀下来，将纯净的蛋白‑聚合物用DTT或其他硫醇类还原剂处理，断掉高分子以得到原蛋白，达到纯化目的蛋白的目的。巯基蛋白酶的表面裸露巯基与其酶活性密切相关，表面巯基被破坏后其酶活性也会丧失，当所述蛋白质为巯基蛋白酶是，该方法可以实现对酶活力的调控。

主权项

1.一种含巯基蛋白质的修饰与分离纯化方法，包括蛋白质的修饰以及修饰后的蛋白质的分离纯化，其特征在于：所述蛋白质的修饰是在蛋白质的巯基上偶联NIPAM聚合物，得到蛋白‑NIPAM聚合物；所述蛋白质的分离纯化方法为：将含有蛋白‑NIPAM聚合物和其它物质的混合溶液加热至32℃以上，使得蛋白‑NIPAM聚合物从混合溶液中析出，离心收集沉淀，得到纯的蛋白‑NIPAM聚合物，最后用硫醇类还原剂处理蛋白‑NIPAM聚合物，然后透析，得到纯化的蛋白质。