[发明专利]一种抗菌肽及其制备方法与应用

摘要

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种抗菌肽及其制备方法与应用。所述的抗菌肽是通过副干酪乳杆菌和马克斯克鲁维酵母混合菌株对牛奶进行发酵制得，主要包括以下步骤：(1)制备混合菌株发酵母液；(2)接种发酵母液进行低温长时间发酵制备乳清；(3)采用超滤技术分离乳清制得含抗菌肽的粗提取液；(4)通过凝胶层析纯化目的抗菌肽。本发明制得的抗菌肽热稳定性好，对人体无刺激作用且抗菌谱广，尤其对痤疮丙酸杆菌有显著抑制作用，可替代抗生素，有效减少抗生素的使用，可用于预防和治疗痤疮。

主权项

1.一种抗菌肽的制备方法，其特征在于包含如下步骤：(1)制备混合菌株发酵母液：将奶粉和水混合，得到质量百分比为8～20％的还原乳，将其乳化均质，然后灭菌，冷却；无菌条件下将副干酪乳杆菌菌悬液和斯克鲁维酵母菌悬液接入冷却后的还原乳中，25～42℃恒温静置培养2～4天，得到发酵母液；(2)以发酵母液制备乳清：将奶粉和水混合，得到质量百分比为5～20％的还原乳，将其乳化均质，然后灭菌，冷却；无菌条件下将步骤(1)制得的发酵母液接入冷却后的还原乳中，然后25～42℃发酵培养2～30天，得到含有乳清的发酵液；(3)超滤分离乳清制得抗菌肽：将步骤(2)制得的含有乳清的发酵液过滤，收集滤液，再经截留分子量为3000～150000道尔顿的超滤膜超滤，得到抗菌肽的粗提取液；(4)凝胶层析纯化目的抗菌肽：以葡聚糖凝胶SephadexG‑25为基质，以磷酸盐缓冲溶液作为洗脱液，将步骤(3)制得的抗菌肽的粗提取液上柱纯化，得到抗菌肽。