[发明专利]用于检测CRISPR/Cas9基因编辑系统切割基因产生移码突变的基因元件及应用在审
| 申请号： | 201811320658.5 | 申请日： | 2018-11-07 |
| 公开（公告）号： | CN109371167A | 公开（公告）日： | 2019-02-22 |
| 发明（设计）人： | 鲁文静;兰峰;张治宇 | 申请（专利权）人： | 北京赛贝生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6897 | 分类号： | C12Q1/6897;C12N15/90;C12N15/85;C12N15/10;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人： | 韩建伟;金田蕴 |
| 地址： | 100220 北京市昌平区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于检测CRISPR/Cas9基因编辑系统切割基因产生移码突变的基因元件及应用。该基因元件包括有效连接的启动子、第一报告基因、REST基因、SV40pA基因、S沉默子、第二报告基因和终止子，其中，启动子与第一报告基因基因之间可插入被切割目标DNA序列，第一报告基因不同于第二报告基因，REST基因的表达能够抑制S沉默子后面第二报告基因的表达。用于检测CRISPR/Cas9基因编辑系统切割基因产生移码突变的基因元件可作为核心元件连接到载体中，可以用来在活细胞胞内鉴定gRNA对基因组的切割效率，该检测具有产生移码突变时是即时荧光表现型、高稳定性的荧光表型和易操作性。 | ||
| 搜索关键词： | 基因 报告基因 基因元件 移码突变 编辑系统 切割 检测 沉默子 启动子 高稳定性 核心元件 切割目标 切割效率 荧光表现 有效连接 活细胞 基因组 可插入 荧光表 终止子 应用 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测CRISPR/Cas9基因编辑系统切割基因产生移码突变的基因元件，其特征在于，所述基因元件包括有效连接的启动子、第一报告基因、REST基因、SV40pA基因、S沉默子、第二报告基因和终止子，其中，所述启动子与第一报告基因基因之间可插入被切割目标DNA序列，所述第一报告基因不同于所述第二报告基因，所述REST基因的表达能够抑制所述S沉默子后面第二报告基因的表达。
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