[发明专利]一种适于香菇菌褶担子细胞形态观察的切片制备方法

摘要

本发明涉及一种适于香菇菌褶担子细胞形态观察的切片制备方法，包括：固定；脱水；浸蜡；包埋；修蜡与切片；展片与烤片；脱蜡；染色与封片。本发明步骤简单，成本低，安全环保，使香菇菌褶担子细胞适于荧光染料染色并被清晰观察，从而为香菇形态发育和生理学研究提供真实有力的结构学证据，具有良好的应用前景。

主权项

1.一种适于香菇菌褶担子细胞形态观察的切片制备方法，包括：(1)选取新鲜香菇菌褶组织作为切片的试验材料；将所选的试验材料切块，放入FAA固定液中于室温下固定；随后将经固定的试验材料脱水；(2)将经脱水的试验材料置于乙醇与低熔点多聚蜡的混合溶剂中，放置在烘箱中直到乙醇挥发完全；待乙醇挥发后，继续放置12～18h；(3)对包埋盒及经步骤(2)处理的试验材料进行预热，随后先在包埋盒中加入低熔点多聚蜡，再将试验材料夹入包埋盒中，室温下静置待低熔点多聚蜡完全凝固，将石蜡块取出，进行修蜡和切片；(4)将步骤(3)得到的切片进行展片，待切片均匀展开后，用涂有粘片剂的载玻片进行捞片；将附着有切片的载玻片进行烤片，随后放入无水乙醇中脱蜡；(5)向脱蜡后的载玻片滴加染色液进行染色，用PBS缓冲液冲洗，在载玻片中央滴入封片剂，用盖玻片封片，即可。