[发明专利]一种丛枝菌根真菌的高效单孢扩繁方法

摘要

本发明公开了一种丛枝菌根真菌的高效单孢扩繁方法，包括：于培养皿内石英砂上均匀摆放微孔滤膜圆片，用移液枪转移AMF孢子至微孔滤膜表面，每片微孔滤膜转移1个外观饱满的新鲜收集的孢子，盖好皿盖，20‑28℃暗培养；取白三叶草种子，浓硫酸表面消毒后催芽；将萌发的孢子连同微孔滤膜圆片一起转移至折叠的浸湿滤纸内，同时转接一颗刚长出真叶的白三叶草幼苗；用1/2强度的霍格兰营养液浸润花盆中的河沙，将携带孢子和白三叶草的滤纸片垂直放入花盆的河沙中；白三叶草生长1个月后检查AMF侵染情况；将成功侵染的白三叶草移栽回花盆，继续培养4个月后收获。本发明单孢扩繁成功率高，耗时短。

主权项

1.一种丛枝菌根真菌的高效单孢扩繁方法，包括以下步骤：（1）在灭菌培养皿中加入灭菌石英砂，用蒸馏水浸润石英砂，于培养皿内石英砂上均匀摆放微孔滤膜圆片，用移液枪转移丛枝菌根真菌（AMF）孢子至微孔滤膜表面，每片微孔滤膜转移1个外观饱满的新鲜收集的孢子，盖好皿盖，20‑28 ℃暗培养；（2）取白三叶草种子，浓硫酸表面消毒5‑10min无菌水冲洗后20‑28℃催芽；（3）准备河沙，于烘箱内灭菌，将灭菌的河沙装入花盆中待用；（4）打开皿盖，于解剖镜下检查孢子萌发情况，将萌发的孢子连同微孔滤膜圆片一起转移至折叠的浸湿滤纸内，同时转接一颗刚长出真叶的白三叶草幼苗；（5）用1/2强度的霍格兰营养液浸润花盆中的河沙，将携带孢子和白三叶草的滤纸片垂直放入花盆的河沙中；（6）白三叶草生长1个月后，将滤纸取出，展开滤纸，于解剖镜下检查AMF侵染情况；（7）将成功侵染的白三叶草移栽回花盆，继续培养4个月后收获。