[发明专利]一种快速高效的秀珍菇菌种繁育方法

摘要

本发明提供了一种快速高效的秀珍菇菌种繁育方法，该方法采用的步骤为：（1）秀珍菇母种的提取：对秀珍菇子实体组织进行培养获得母种；（2）母种超声波脉冲处理；（3）母种的扩繁；（4）母种液体培养：将母种经过摇瓶培养和种子罐培养获得种子液；（5）种子液发酵罐培养：将种子液接种至发酵罐中，经过搅拌通气发酵可制得秀珍菇液体菌种。本发明改变了传统秀珍菇菌种的固体培育方法，在秀珍菇菌种繁育中运用了微生物液体发酵技术，制备出了优质的秀珍菇液体菌种。本发明提供的方法菌种培养周期短、生物量大、繁育效率高，获得的菌种纯净、无杂菌，接种后出菇整齐，便于管理；而且本发明的方法工艺简单、节约成本，一些发酵原材料还能够就地取材，废物利用。

主权项

1.一种快速高效的秀珍菇菌种繁育方法，其特征在于，该方法采用以下步骤：（1）秀珍菇母种的提取：筛选具有本菌株特性、健壮无病、形态正常的秀珍菇成熟子实体，置于超净工作台中操作，先用75%乙醇对子实体外表进行擦拭消毒，然后用无菌刀片切取菌柄与菌盖交界处的组织块接到改良PDA培养基斜面上，置于温度23~27℃、相对湿度75~85%的黑暗条件下培养，1~2d后菌丝开始萌发，筛选出菌丝生长速度快和长势强的斜面作为母种；（2）母种超声波脉冲处理：采用超声波智能生化反应仪对筛选出的母种进行超声波脉冲处理，超声频率为35KHz，功率为30W，超声时间15s，超声间隔5s，超声全程40min；（3）母种的扩繁：将上述母种接种到装有改良PDA培养基的平皿中，置于与步骤（1）相同的条件下培养，期间每隔2d检查1次，及时去除污染，直到菌丝长满平皿；（4）母种液体培养：将扩繁后的秀珍菇母种菌块按照每块5mm，5~6块/瓶的接种量接种于装有100mL液体培养基的250mL摇瓶中，避光静置24h后置于恒温摇床上培养5~7d获得菌液；再将菌液按照4~6%（v/v）的接种量接种于装有相同液体培养基的种子罐中，温度22~26℃，搅拌通气培养6~8d获得种子液；（5）种子液发酵罐培养：将发酵培养基装入发酵罐中，装液量为发酵罐容量的70%~80%，通入空气搅拌均匀后，密封罐口进行高压蒸汽灭菌；灭菌结束后，待发酵罐内压力降至0，培养基温度降至30℃以下时，在无菌条件下按照4~6%（v/v）的接种量从接种口注入步骤（4）获得的秀珍菇种子液，关闭接种口后开始发酵罐培养，培养期间发酵罐温度控制在23~25℃，转速控制在140~160r/min，罐压控制在0.01~0.03MPa，通气量控制在4.0~5.0L/min，一共培养5~7d，获得符合标准的发酵菌种。