[发明专利]外泌体的提取方法在审
申请号: | 201811373858.7 | 申请日: | 2018-11-19 |
公开(公告)号: | CN109536440A | 公开(公告)日: | 2019-03-29 |
发明(设计)人: | 廉翠红;朱艳霞;张远远 | 申请(专利权)人: | 深圳市第二人民医院 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 深圳中一专利商标事务所 44237 | 代理人: | 高星 |
地址: | 518000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种外泌体的提取方法。该方法包括如下步骤:用含无外泌体血清的培养基培养人脂肪来源间充质干细胞,得到培养上清液,所述培养上清液中含有外泌体;将所述培养上清液进行第一离心处理后,取上清进行第二离心处理,然后取上清得到离心液;将所述离心液用100KD超滤管进行超滤浓缩处理,得到超滤液;将所述超滤液进行第三离心处理后,用0.22μm过滤器进行过滤除菌处理,得到浓缩液;将所述浓缩液进行第四离心处理,弃上清得到所述外泌体。该方法可高效地从人脂肪来源间充质干细培养上清液中提取到高浓度、高纯度的外泌体。 | ||
搜索关键词: | 培养上清液 离心处理 脂肪来源 超滤液 离心液 浓缩液 间充质干细胞 生物技术领域 过滤器 培养基培养 超滤浓缩 过滤除菌 超滤管 高纯度 间充质 血清 | ||
【主权项】:
1.一种外泌体的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:用含无外泌体血清的培养基培养人脂肪来源间充质干细胞,得到培养上清液,所述培养上清液中含有外泌体;将所述培养上清液进行第一离心处理后,取上清进行第二离心处理,然后取上清得到离心液;将所述离心液用100KD超滤管进行超滤浓缩处理,得到超滤液;将所述超滤液进行第三离心处理后,用0.22μm过滤器进行过滤除菌处理,得到浓缩液;将所述浓缩液进行第四离心处理,弃上清得到所述外泌体;其中,所述第一离心处理的离心力为600‑1000g,所述第二离心处理的离心力为2000‑2800g,所述第三离心处理的离心力为9000‑11000g,所述第四离心处理的离心力为90000‑110000g。
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