[发明专利]一种使用单细胞打印机进行单细胞分选的方法在审
| 申请号： | 201811382635.7 | 申请日： | 2018-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN109554332A | 公开（公告）日： | 2019-04-02 |
| 发明（设计）人： | 李琴;张肖肖;张文康;张朗;董慧芳;蔡洁行;周伟昌;陈智胜 | 申请（专利权）人： | 上海药明生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人： | 郑权 |
| 地址： | 200131 上海市浦东新区自由*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开一种使用单细胞打印机进行单细胞分选的方法，包括：1)样本准备：将传代培养的CHO‑K1细胞离心5min，使用无菌Dulbecco's磷酸盐缓冲液或者传代培养基重悬，使细胞密度为1E6cells/mL；2)液滴调整参数设置：启动单细胞打印机的液滴质量控制，设置触发延迟为3ms，深度为10μm，速度为120μm/ms；3)分选参数设置：设置细胞直径12μm‑18μm、细胞圆度55％‑100％以及细胞检测半径为60μm；4)分选：将单细胞打印机的墨盒中的细胞样本分选到孔板中，每孔分选1个细胞。本发明的方法能使提高单细胞分选效率以及单克隆的恢复率，相比现有技术中的CHO‑K1细胞其他分选和培养条件有显著的进步。 | ||
| 搜索关键词： | 分选 打印机 细胞 液滴 传代 墨盒 磷酸盐缓冲液 参数设置 传代培养 调整参数 培养条件 细胞检测 细胞离心 细胞样本 样本准备 培养基 恢复率 质量控制 触发 孔板 无菌 圆度 重悬 延迟 | ||
【主权项】：
1.一种单细胞分选的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)样本准备：将传代培养的CHO‑K1细胞离心5min，使用无菌Dulbecco's磷酸盐缓冲液或者传代培养基重悬，使细胞密度为1E6cells/mL；2)单细胞打印机的液滴调整参数设置：启动单细胞打印机的液滴质量控制，设置触发延迟为3ms，深度为10μm，速度为120μm/ms；3)单细胞打印机的分选参数设置：设置细胞直径12μm‑18μm、细胞圆度55％‑100％以及细胞检测半径为60μm；4)分选：将单细胞打印机的墨盒中的细胞样本分选到孔板中，每孔分选1个细胞。
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