[发明专利]一种重组G-17蛋白及其单克隆抗体的制备在审
申请号: | 201811384893.9 | 申请日: | 2018-11-20 |
公开(公告)号: | CN109762058A | 公开(公告)日: | 2019-05-17 |
发明(设计)人: | 刘清泉;胡祥叶;朱伟;项美华;武戌青;王立童;吴琼杉;余铭恩 | 申请(专利权)人: | 杭州贤至生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/595 | 分类号: | C07K14/595;C12N15/16;C12N15/70;C12N1/21;C07K16/26;G01N33/74;G01N33/577 |
代理公司: | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 | 代理人: | 朱海江 |
地址: | 311100 浙江省杭州市余杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明属于生物技术领域。本发明提供了一种重组蛋白,该重组蛋白包含胃泌素‑17(以下称G‑17)全部抗原表位,并将全部抗原表位序列通过柔性片段(连续四个甘氨酸)连接后重复十次,形成重组G‑17蛋白氨基酸序列。为提高该重组蛋白在原核表达系统中的产量,采用大肠杆菌偏爱密码子将该重组蛋白氨基酸序列转换为对应核苷酸序列,通过化学合成该核苷酸序列并构建重组蛋白表达载体。本发明还涉及该重组蛋白单克隆抗体的制备,经过抗原免疫、细胞融合及多轮筛选后得到单克隆细胞株。纯化的单克隆抗体经过蛋白分子相互作用仪筛选出优势抗体配对,分别标记荧光微球和包被NC膜,通过实验确定最佳单抗配对组合,可用于G‑17的定量检测。 | ||
搜索关键词: | 重组蛋白 单克隆抗体 核苷酸序列 抗原表位 配对 制备 大肠杆菌偏爱密码子 蛋白氨基酸序列 筛选 单克隆细胞株 生物技术领域 原核表达系统 重组蛋白表达 氨基酸序列 标记荧光 蛋白分子 定量检测 化学合成 抗原免疫 柔性片段 细胞融合 甘氨酸 胃泌素 包被 单抗 多轮 构建 抗体 可用 微球 蛋白 重复 转换 | ||
【主权项】:
1.一种重组蛋白,其特征在于该重组蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID No:1所示。
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