[发明专利]用于检测β淀粉样蛋白(Aβ)的磁微粒分离化学发光免疫测定法

摘要

本发明公开了一种人体β淀粉样蛋白(Aβ)磁微粒分离化学发光免疫检测方法，试剂盒组成包括：校准品、质控品试剂A、试剂B、清洗液浓缩液、发光底物液，其中，校准品为含一系列浓度的β淀粉样蛋白(Aβ)抗原，用于建立标准曲线；质控品为含一定浓度β淀粉样蛋白(Aβ)抗原的缓冲液配制而成；试剂A为含一定浓度磁微粒标记的β淀粉样蛋白(Aβ)抗体溶液；试剂B为含一定浓度碱性磷酸酶标记的β淀粉样蛋白(Aβ)抗体溶液；清洗液浓缩液用于配制清洗液；发光底物液为碱性磷酸酶(ALP)催化的发光底物溶液。本发明极大地提高了免疫反应的信号强度和灵敏度，使低含量物质在进行免疫结合时也能产生很强的化学发光信号，为人体β淀粉样蛋白(Aβ)的检测提供了一种更准确、精确、方便、快捷和简单的方法。

主权项

1.人体β淀粉样蛋白(Aβ)磁微粒分离化学发光免疫检测方法，其特征在于，试剂盒组成包括：校准品、质控品试剂A、试剂B、清洗液浓缩液、发光底物液，其中，校准品为含一系列浓度的β淀粉样蛋白(Aβ)抗原，用于建立标准曲线；质控品为含一定浓度β淀粉样蛋白(Aβ)抗原的缓冲液配制而成；试剂A为含一定浓度磁微粒标记的β淀粉样蛋白(Aβ)抗体溶液；试剂B为含一定浓度碱性磷酸酶标记的β淀粉样蛋白(Aβ)抗体溶液；清洗液浓缩液用于配制清洗液；发光底物液为碱性磷酸酶(ALP)催化的发光底物溶液；检测方法包括：(1)免疫反应：将待测样品与质控品、50μl试剂A、50μl试剂B依次加入反应管中，37℃条件下混合温育15min；(2)磁分离：使磁微粒在磁场中沉降，去上清，加入200‑500μl清洗液，去除磁场，然后再次使磁微粒在磁场中沉降，去除上清液；如此重复2‑4次，以去除未结合的抗体和杂质；(3)读值：加入发光底物液150μl，碱性磷酸酶(ALP)催化底物发光后采用利德曼自研化学发光检测仪测定相对发光强度(RLU)；(4)算出含量：将待测样本的发光强度与校准品的标准曲线比对，使用四参数Logistic方程拟合可计算出待测样本中β淀粉样蛋白(Aβ)的含量。