[发明专利]一种小分子岩藻多糖的制备方法

摘要

本发明公开了一种小分子岩藻多糖的制备方法，采用本发明的制备方法，制得岩藻多糖分子量小于10KDa，其中岩藻多糖的制备步骤为：取海带粉末，加入去离子水，提取液过滤收集滤液，滤液浓缩后用CaCl₂和sevage法除杂质，收集滤液，搅拌下向提取液中加入乙醇至乙醇体积浓度为60％‑90％，静置或离心，收集沉淀烘干，得岩藻多糖。岩藻多糖经DEAE‑52纤维素阴离子交换柱纯化后，透析冻干得各种组分，在浓度为0.01mol/L‑0.2mol/L的HCl水溶液和H₂O₂、氨水下进行水解，透析即得。采用本发明制备的小分子量岩藻多糖为均一多糖，且硫酸根含量保持稳定，多糖水溶性增加。

主权项

1.一种小分子岩藻多糖的制备方法，其特征在于所述方法为：(1)粗岩藻多糖提取：将干海带粉与溶剂混合，在60‑100℃浸提1‑5h，将浸提液离心，获得提取液；并将提取液减压浓缩至1/2‑1/15体积，获得浓缩液；所述溶剂为体积浓度95％乙醇水溶液或去离子水；所述溶剂体积用量以干海带粉质量计为25‑50ml/g；然后向浓缩液中加质量浓度1％～4％CaCl₂水溶液，搅拌至无沉淀产生，离心，取上清液浓缩至1/2～1/3倍体积后，采用sevage法除蛋白，取水层旋转蒸发除去残留的氯仿，用14KDa透析袋于去离子水中透析；取截留液加入无水乙醇至乙醇体积浓度为50％‑90％，搅拌，在4℃下静置过夜，离心，沉淀干燥，得粗岩藻多糖；(2)粗岩藻多糖纯化：将粗岩藻多糖用去离子水溶解后，上样DEAE‑52纤维素阴离子交换柱，分别用去离子水，0.3M NaCl水溶液、0.6M NaCl水溶液、0.9M NaCl水溶液、1.5M NaCl水溶液、2.0M NaCl水溶液进行洗脱，分别收集0.9M NaCl水溶液、1.5M NaCl水溶液、2.0M NaCl水溶液的流出液，分别用14KDa透析袋于去离子水中透析，取截留液冻干，分别获得三种纯化岩藻多糖；(3)小分子岩藻多糖的制备：将步骤(2)三种纯化岩藻多糖用浓度为0.01～0.2mol/L的HCl水溶液制成质量浓度为0.5～5％的岩藻多糖溶液，于30℃‑100℃下搅拌水解10min‑2h，反应液调pH为7后，用3.5KDa透析袋于去离子水中透析24h，取截留液浓缩至1/3体积后，加入体积浓度10～30％H₂O₂水溶液，再加入体积浓度5～20％氨水调节pH为8.5，室温避光放置30min，离心，上清液用3.5KDa透析袋于去离子水中透析，取截留液冻干，分别获得小分子岩藻多糖。