[发明专利]一种高纯度替考拉宁的生产工艺

摘要

本发明提供了一种高纯度替考拉宁的生产工艺，包括如下步骤：1)配制斜面培养基、种子培养基和发酵培养基；2)发酵液的制备；3)洗脱液的制备；4)制得成品；本发明中Mg2+能够提高游动放线菌细胞葡萄糖氧化酶的活力，Fe3+对活菌的生长和芽孢的生成均有促进作用，Mg2+和Fe3+通过协同作用产生活性中心，有效的催化发酵的进行，提高了替考拉宁的产率。

主权项

1.一种高纯度替考拉宁的生产工艺，其特征在于，包括如下步骤：1)配制斜面培养基、种子培养基和发酵培养基；其中，斜面培养基的配制方法为：按照重量份数称取可溶性淀粉5‑8份、酵母膏0.5‑1.5份、葡萄糖1‑3份、琼脂粉2‑4份、碳酸钙0.1‑0.5份、乙酸0.2‑1份、[Mg2‑2xFe2x(OH)4][SO4]x·mH2O 2‑4份配制斜面培养基，调节pH为6.8‑7.0；其中，种子培养基的配制方法为：按照重量份数称取可溶性淀粉7‑10份、甘露醇3‑5份、酵母粉3‑6份、蛋白胨2‑5份配制种子培养基，调节pH为7.2‑7.4；其中，发酵培养基的配制方法为：按照重量份数称取糊精1‑3份、可溶性淀粉10‑15份、黄豆粉2‑5份、玉米浆6‑10份、碳酸钙0.1‑0.5份配制发酵培养基，调节pH为6.8‑7.0；2)刮取新鲜斜面接种到装有一定量种子培养基的250ml摇瓶中，在30℃条件下以200‑210r/min的转速振荡培养4‑5天，以8‑10％接种量将游动放线菌接种到装有30‑40ml发酵培养基的250ml三角瓶中，加入适量Diaion HP‑20离子交换树脂，在30℃条件下以200‑210r/min的转速振荡培养7‑9天，得发酵液；3)调节发酵液pH为10‑11，在3500‑3600r/min的条件下进行8‑10min离心，取上清液，将上清液进行过滤，滤液经过吸附树脂层析柱，采用纯水进行一次洗脱，随后采用氨水进行二次洗脱，得洗脱液；4)将洗脱液pH调节为6‑7，通过节流分子量为6000‑7000Da的超滤膜进行超滤，将超滤液进行浓缩、喷雾干燥，即得。