[发明专利]一种植物基因组定向碱基编辑骨架载体及其应用有效
| 申请号： | 201811403794.0 | 申请日： | 2018-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN110607320B | 公开（公告）日： | 2023-05-12 |
| 发明（设计）人： | 张勇;唐旭;郑雪莲;任秋蓉;周建平;邓科君 | 申请（专利权）人： | 电子科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82 |
| 代理公司： | 成都泰合道知识产权代理有限公司 51231 | 代理人： | 孙恩源 |
| 地址： | 611731 四川省成*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种植物基因组定向碱基编辑骨架载体及其应用。本发明要解决的技术问题是提升植物细胞基因组的定向碱基编辑效率、拓展碱基编辑窗口。本发明解决技术问题的技术方案是提供一种植物基因组定向碱基编辑骨架载体，该骨架载体由一个Pol Ⅱ型启动子驱动nCas9‑PmCDA1核酸酶‑胞嘧啶脱氨酶融合蛋白表达单元和合成向导RNA(sgRNA)转录表达单元两个核心区域构成的核心单元的转录。本发明单一转录单元定向碱基编辑骨架载体，可有效实现胞嘧啶碱基(C)转变为胸腺嘧啶碱基(T)的简单、快捷、高效定向编辑，是一种有效实现植物基因组碱基定向编辑的分子工具。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 植物 基因组 定向 碱基 编辑 骨架 载体 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.植物基因组定向碱基编辑骨架载体，其特征在于：包含一个由nCas9-PmCDA1核酸酶-胞嘧啶脱氨酶融合蛋白表达单元和合成向导RNA(sgRNA)转录表达单元两个核心区域构成的核心单元，该核心单元由一个Pol Ⅱ型启动子驱动转录；/n所述核心单元从5’到3’方向依次为nCas9 ORF-PmCDA1-Poly A-sgRNA cloningscaffold-T；所述的nCas9 ORF为酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)核酸酶蛋白D10A突变体编码框；PmCDA1为胞嘧啶脱氨酶编码区功能单元；Poly A为多聚A区域；sgRNAcloning scaffold为sgRNA克隆及转录单元，且sgRNA cloning scaffold至少为一个；T为终止子。/n
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