[发明专利]一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法在审
申请号: | 201811408499.4 | 申请日: | 2018-11-23 |
公开(公告)号: | CN110632187A | 公开(公告)日: | 2019-12-31 |
发明(设计)人: | 王敏;朱瑞雪;韩林;王玉堂;方纯;彭强 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74 |
代理公司: | 11465 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人: | 李冉 |
地址: | 712100 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种柱前衍生高效液相色谱‑荧光检测器测定荞麦中D‑荞麦碱的方法。以芴甲氧酰氯为衍生试剂,pH=8.5、20℃水浴反应20min进行衍生。采用岛津LC‑20A高效液相色谱仪,RF‑20A荧光检测器;TIANHE Kromasil C18(5μm,4.6mm×250mm)色谱柱;柱温为28℃;流动相为40:60(v/v)的乙腈:0.1%的乙酸水溶液;流速为1mL/min;激发波长为240nm,发射波长为315nm;分析时间为40min;进样量为10μL进行测定,并记录峰面积。采用外标法绘制D‑荞麦碱衍生物峰面积‑衍生物浓度标准曲线,进而计算得出样品中D‑荞麦碱的含量。 | ||
搜索关键词: | 荞麦 荧光检测器 高效液相色谱仪 高效液相色谱 浓度标准曲线 乙酸水溶液 发射波长 激发波长 碱衍生物 水浴反应 衍生试剂 柱前衍生 进样量 流动相 色谱柱 外标法 乙腈 柱温 酰氯 绘制 记录 分析 | ||
【主权项】:
1.一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中D-荞麦碱的方法,其特征在于采用柱前衍生、高效液相色谱法进行测定,具体步骤包括:/n(1)荞麦样品的配制;/n(2)D-荞麦碱系列标准溶液的配制;/n(3)样品及D-荞麦碱系列标准溶液的衍生;/n(4)将D-荞麦碱系列标准溶液衍生物用0.22μm针头过滤器过滤,采用高效液相色谱法测定D-荞麦碱衍生物并记录峰面积,以外标法绘制D-荞麦碱系列标准溶液衍生物峰面积-衍生物浓度标准曲线,得出标准曲线回归方程;/n(5)将样品衍生物用0.22μm针头过滤器过滤,采用高效液相色谱法测定样品衍生物中D-荞麦碱并记录峰面积,根据步骤(4)中回归方程计算得出样品中D-荞麦碱的含量;/n所述色谱条件为:/n岛津LC-20A高效液相色谱仪配RF-20A荧光检测器;/n色谱柱:TIANHE Kromasil C18(5μm,4.6mm×250mm);/n柱温:28℃;/n流动相:乙腈/0.1%的乙酸水,40/60(v/v);/n流速:1mL/min;/n激发波长:240nm,发射波长:315nm;/n进样量:10μL;/n分析时间:40min。/n
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