[发明专利]外周血来源的树突状细胞培养方法在审
申请号: | 201811409253.9 | 申请日: | 2018-11-23 |
公开(公告)号: | CN109486763A | 公开(公告)日: | 2019-03-19 |
发明(设计)人: | 程旭东 | 申请(专利权)人: | 中生康元生物科技(北京)有限公司 |
主分类号: | C12N5/0784 | 分类号: | C12N5/0784 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 王术兰 |
地址: | 100000 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及细胞培养技术领域,具体而言,涉及一种外周血来源的树突状细胞培养方法,所述方法包括如下步骤:1)将从外周血中分离得到的PBMC细胞使用培养基A培养,得到离体未成熟树突状细胞;2)将所述离体未成熟树突状细胞在培养基B中培养,得到成熟树突状细胞;其中,所述培养基A为额外添加包括下列成分的AIM‑V培养基:0.8~1.2v/v%自体血浆、GM‑CSF 40~60ng/mL、IL‑4 40~60ng/mL;所述培养基B为在所述培养基A的基础上额外添加TNF‑α7~13ng/mL以及PEG‑2 0.8~1.2μg/mL。本发明通过优化培养流程,筛选和优化诱导成熟因子组分,大大提高了成熟DC细胞的比例,提高了细胞质量,还能降低培养成本。 | ||
搜索关键词: | 培养基 外周血 未成熟树突状细胞 树突状细胞 离体 成熟树突状细胞 细胞培养技术 成熟因子 自体血浆 优化 诱导 筛选 细胞 成熟 | ||
【主权项】:
1.一种外周血来源的树突状细胞培养方法,其特征在于,包括如下步骤:1)将从外周血中分离得到的PBMC细胞使用培养基A培养,得到离体未成熟树突状细胞;2)将所述离体未成熟树突状细胞在培养基B中培养,得到成熟树突状细胞;其中,所述培养基A为额外添加包括下列成分的AIM‑V培养基:0.8~1.2v/v%自体血浆、GM‑CSF 40~60ng/mL、IL‑4 40~60ng/mL;所述培养基B为在所述培养基A的基础上额外添加TNF‑α7~13ng/mL以及PEG‑2 0.8~1.2μg/mL。
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