[发明专利]一种细胞转染的蛋白质载体

摘要

本发明公开了一种细胞转染的蛋白质载体的制备。所述制备方法为：首先利用邻苯二甲酸酐与壳聚糖反应，将氨基保护，再将其与2‑溴异丁酰溴反应，得到ATRP大分子引发剂，并将邻苯二甲酰胺基团脱去，得到Chi‑Br大分子引发剂，最后通过ATRP可控聚合反应，得到壳聚糖与聚(2‑甲基丙烯酰氧乙基磷酰胆碱)接枝物(Chi‑PMPC)，即可用作蛋白质转染载体。本发明所使用的主题材料壳聚糖为天然多糖类物质，同时接枝的聚(2‑甲基丙烯酰氧乙基磷酰胆碱)也是具有仿红细胞外表面细胞膜的脂质层结构的特点，因而制备的壳聚糖与聚(2‑甲基丙烯酰氧乙基磷酰胆碱)接枝物具有很好的生物相容性和材料稳定性。

主权项

1.一种细胞转染的蛋白质载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将壳聚糖与邻苯二甲酸酐分散于N,N‑二甲基甲酰胺(DMF)中，于氩气气氛下搅拌并加热反应制备得到N‑邻苯二甲酰‑壳聚糖(NP‑Chi)；(2)将步骤(1)中反应产物N‑邻苯二甲酰‑壳聚糖溶于二甲基亚砜(DMSO)中，加入2‑溴异丁酰溴和三乙胺，于室温下搅拌反应得到N‑邻苯二甲酰‑壳聚糖ATRP大分子引发剂(NP‑Chi‑Br)；(3)将步骤(2)中反应产物NP‑Chi‑Br溶于N‑甲基吡咯烷酮(NMP)中，加入肼一水合物(hydrazine monohydrate)溶液，在氩气气氛下搅拌并加热反应得到壳聚糖ATRP大分子引发剂(Chi‑Br)；(4)将步骤(3)中产物Chi‑Br和2‑甲基丙烯酰氧乙基磷酰胆碱(MPC)溶于DMSO中，于氮气保护下加入溴化亚铜(CuBr)和联吡啶(bpy)，室温下搅拌反应后得到产物壳聚糖与聚(2‑甲基丙烯酰氧乙基磷酰胆碱)接枝物(Chi‑PMPC)。