[发明专利]一种畜禽沙门氏菌活菌快速检测方法在审
| 申请号： | 201811426324.6 | 申请日： | 2018-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN109371112A | 公开（公告）日： | 2019-02-22 |
| 发明（设计）人： | 刘光富;王金君;俞晓平;张明洲 | 申请（专利权）人： | 中国计量大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851;C12Q1/10;C12R1/42 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 郑海峰 |
| 地址： | 310018 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种畜禽沙门氏菌活菌快速检测方法，该方法利用PMA能与待检样品中死菌胞内DNA结合，而不与活菌细胞DNA结合的特性，通过荧光定量PCR检测样品中沙门氏菌活菌的活菌数。本发明方法可以只检测出沙门氏菌活菌并进行计数。将此方法运用到畜禽制品中的沙门氏菌的检测，并与传统的细菌培养计数方法进行比较，结果证明本发明灵敏快速、污染率低、成本低，能准确地对沙门氏菌活菌进行定性和定量检测，可用于对畜禽制品沙门氏菌污染的监测。 | ||
| 搜索关键词： | 沙门氏菌 活菌 快速检测 畜禽制品 畜禽 荧光定量PCR检测 沙门氏菌污染 待检样品 定量检测 细菌培养 细胞DNA 传统的 活菌数 污染率 检测 菌胞 可用 灵敏 定性 监测 | ||
【主权项】：
1.一种畜禽沙门氏菌活菌快速检测方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)待检样品的制备：取1‑5g畜禽制品置于增菌液中37℃过夜培养；(2)取500μL过夜培养的增菌液于eppendorf管中，2000‑3000rpm离心5min,弃上清，沉淀用无菌水悬浮；(3)样本的PMA处理：取适量PMA工作液加入到上述eppendorf管中，使样品中PMA终浓度为12μg/mL，充分混匀；(4)将eppendorf管置于冰上，放暗处孵育10min,然后置于卤钨灯下曝光7min；(5)样本DNA提取：将步骤(4)处理的eppendorf管置于沸水中煮10min，立即放冰上冷却10min，然后10000rpm离心2‑3min,上清液即可作为待用的样本DNA模板；(6)以步骤(5)提取的样本DNA为模板，设计引物，进行荧光定量PCR定量检测样本中的沙门氏菌活菌。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国计量大学，未经中国计量大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811426324.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
