[发明专利]一种适用于EB病毒DNA提取的方法及提取试剂盒

摘要

本发明涉及一种适用于EB病毒DNA提取的方法及提取试剂盒，所述方法将血液离心分离成上清血浆、中间白细胞层和下层红细胞层，然后分别处理后再进行裂解，采用吸附柱提取并收集得到DNA溶液。本发明的有益效果：本发明通过核酸释放剂裂解细胞，释放核酸，利用硅胶膜在高盐低pH会选择性的吸附核酸，在低盐高pH时，释放核酸的特性，达到纯化核酸的目的；提取的DNA纯度更高，含量更高，且DNA的完整性较好，基本上没有降解；通过本发明的提取方法进行提取纯化得到的EB病毒DNA的定量更加全面与准确。

主权项

1.一种适用于EB病毒DNA提取的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)样品前处理：抽取2ml血液样品，注入到抗凝管中，立即颠倒混匀；离心后分离上清液得到上清血浆和下层物质，向所述上清血浆中加入裂解液Ⅰ和Proteinase K，混合均匀后温育消化，形成上清待提取液；向所述下层物质中加入红细胞裂解液，静置裂解后离心分离，弃去上清，然后用PBS洗去红色沉淀，剩余的白色沉淀用裂解液Ⅰ悬浮，温育消化，形成沉淀待提取液；(2)裂解：将步骤(1)得到的所述上清待提取液和所述沉淀待提取液混合后加入裂解液Ⅱ，震荡混匀后离心，取上清液加入异丙醇，混合均匀，转移到已装入收集管的吸附柱中，吸附并离心后，取出所述吸附柱，倒掉所述收集管中的废液，并将所述吸附柱放回所述收集管中；(3)DNA溶液收集：用洗涤液对步骤(2)所述收集管中的吸附柱进行洗涤，离心后弃去废液；再用无水乙醇进行洗涤，离心后弃去废液；将所述吸附柱进行继续离心后弃去废液，然后晾干；最后在吸附柱中间部位加入洗脱液或灭菌水室温孵育，离心后收集DNA溶液即可。