[发明专利]一种大鳞鲃精子保存液的使用方法

摘要

本发明公开了一种大鳞鲃精子保存液的使用方法，包括以下步骤：一、选择亲鱼；二、精液采集；三、精子活力的测定；四、人工授精鱼受精率的测定。本发明研究设计的精子保存液，使得精液离体60/S内，精子在保存液中具有较强的活力，在生产中可一次性抽取精液，并根据雌鱼卵量使用精液量，抽取的精液可用于多条雌鱼受精，此方法解决了雄鱼数量少，满足不了雌鱼受精的困惑，避免了鱼在人繁常规操作时，雄鱼精液挤出过量的浪费问题，显著增强精子活力、延长精子寿命、提高受精率，为大鳞鲃规模化养殖提供了技术支撑。

主权项

1.一种大鳞鲃精子保存液的使用方法，其特征在于：包括以下步骤：一、选择亲鱼:选取体质重1.44～1.82g， 体长为47.6～48.9 cm，性成熟良好的亲鱼；二、精液采集：选取步骤一中健康、体表鳞片完整的性成熟雄鱼，进行腹部一次注射催产剂，注射催产剂的雄鱼放入水温为23‑25℃暂养桶中催产，催产至10‑14h时取精液，在精子离体被激活开始时间为0/S、 30/S、60/S、90/S时,记录精子活力状况，采精时，擦干待抽取精液鱼的生殖孔，轻压腹部，用1ml注射器抽取精液，抽取的精液放入容量为1mL的干燥离心管中，用湿纱布封口，以免精液干，抽取的精液呈乳白色，无血、尿、粪便和粘液的污染；三、精子活力的测定：（1）将精子保存液与精液按比例 250：1倍稀释混合, 得精子混合液；（2）抽取5µl精子混合液，滴入载玻片上，使用10x10倍显微镜，以观察一个视野为准；（3）从精子保存液与精液相混合开始计算精子激烈运动的时间，精子激烈运动时呈“旋涡”状运动，精子分路线运动，精子快速运动是大约70%转入中速运动为主，50% 和30%时段，精子运动分别为速度缓慢和部分精子原地打颤，当视野中大约95%精子停止运动为寿命终止时间；四、人工授精鱼受精率的测定：取雌鱼卵，按5.0万粒雌鱼卵，加1ml精液，将精液覆盖卵上，用干净羽毛将精液与卵搅拌均匀使其充分接触，立即精子保存液70ml, 迅速搅拌30‑40秒后立即倒入孵化桶，流水孵化，微充气，受精卵发育至囊胚后期时统计受精率。