[发明专利]一种病原微生物快速检测方法

摘要

本发明提供了一种病原微生物快速检测方法，包括如下的步骤：在双功能化Au@超薄Pt纳米材料表面修饰上待测病原微生物抗体，获得检测探针；在羧基化磁珠表面偶联修饰上所述待测病原微生物抗体，获得捕获探针；将待测样品依次与捕获探针和检测探针孵育后，获得类似三明治的夹心产物，所得产物在酸性条件下与TMB、H₂O₂混合，检测混合液在1608cm^‑1处拉曼峰的强度变化值，根据定量分析标准工作曲线计算出待测样品浓度。本方法的构建过程和检测过程快速简单，且采用Au@超薄Pt纳米材料和羧基化磁珠对TMB进行协同催化，不仅成本大大降低、而且灵敏度大大提高，适合病原微生物在基层和现场的快速、高灵敏检测。

主权项

1.一种病原微生物快速检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、在Au@超薄Pt纳米材料表面修饰上待测病原微生物抗体，所得产物记为检测探针；S2、筛选获得磁学性能优良、同时具有一定模拟酶活性的羧基化磁珠，在所述羧基化磁珠表面，通过EDC活化偶联的方式修饰上S1所述的待测病原微生物抗体，所得产物记为捕获探针；S3、将S2所述捕获探针与一系列已知浓度的病原微生物样品孵育，磁分离洗涤，重悬，再加入S1所述检测探针孵育，磁分离洗涤后将获得的夹心产物重悬处理；S4、将S3所得产物在酸性条件下与TMB、H₂O₂混合，构成催化反应体系，反应1‑2min，取部分混合液滴至锡箔纸上进行拉曼测试，以病原微生物浓度的对数为横坐标，以对应的1608cm^‑1处拉曼峰的强度变化值为纵坐标，绘制定量分析标准工作曲线；S5、将待测未知浓度病原微生物样品依次与捕获探针和检测探针孵育后，所得产物在酸性条件下与TMB、H₂O₂混合，检测混合液在1608cm^‑1处拉曼峰的强度变化值，根据定量分析标准工作曲线计算出样品中待测病原微生物的浓度。