[发明专利]一种胎盘间充质干细胞的分离方法在审
申请号: | 201811472346.6 | 申请日: | 2018-12-04 |
公开(公告)号: | CN109536442A | 公开(公告)日: | 2019-03-29 |
发明(设计)人: | 贾在美;黄玉香;刘超;姜磊;刘艳妍 | 申请(专利权)人: | 青岛奥克生物开发有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 266000 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供了一种胎盘间充质干细胞的分离方法,属于生物技术领域。本发明先取离心管,在垂直于离心管轴线的平面上放置一片滤板,使滤板下方的离心管容积占离心管总容积的20~40%,滤板中心位置设置圆孔;滤板还设置若干个相互平行的条形筛条,每两个相邻筛条之间形成长方形筛孔;然后通过圆孔向离心管中加入细胞分离液至液面没过滤板;再将新鲜的胎盘组织消化液加入到离心管中,1000~2000rpm离心10~30min;最后倒掉滤板上层消化液,用吸管穿过圆孔,吸取得到含有胎盘间充质干细胞的细胞分离液。本发明提供的方法不用中和胰酶,不须用100um细胞筛网过滤,操作简单、快速,能提高干细胞产量和活力。 | ||
搜索关键词: | 离心管 滤板 胎盘间充质干细胞 圆孔 细胞分离液 消化液 生物技术领域 吸管 长方形筛孔 胎盘组织 细胞筛网 相邻筛条 干细胞 过滤板 条形筛 液面 胰酶 过滤 平行 垂直 上层 中和 穿过 新鲜 | ||
【主权项】:
1.一种胎盘间充质干细胞的分离方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)取离心管,在垂直于离心管轴线的平面上放置一片滤板,使滤板下方的离心管容积占离心管总容积的20~40%,所述滤板的中心位置设置一个用于加液的圆孔,所述圆孔的直径为0.45~0.75cm;所述滤板还设置若干个相互平行的条形筛条,每两个相邻筛条之间形成长方形筛孔,所述筛孔的宽为0.15~0.25cm;(2)通过步骤(1)所述圆孔向离心管中加入细胞分离液,所述细胞分离液的添加量以没过滤板为标准;(3)将新鲜的胎盘组织消化液加入到离心管中,1000~2000rpm离心10~30min,实现组织消化液的分层;(4)倒掉滤板上层消化液,穿过圆孔吸取滤板下的含有胎盘间充质干细胞的细胞分离液。
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