[发明专利]一种渗透液与一种根癌农杆菌介导的草莓快速简易稳定遗传转化方法在审
申请号: | 201811480483.4 | 申请日: | 2018-12-05 |
公开(公告)号: | CN109517839A | 公开(公告)日: | 2019-03-26 |
发明(设计)人: | 王静;赵密珍;庞夫花;豆伟涛 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 210000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供一种渗透液与一种根癌农杆菌介导的草莓快速简易稳定遗传转化方法,属于植物生物学技术领域,包括Triton X‑100和Silwet L‑77等。将渗透液与单克隆菌体混合调混合液的OD600值为0.6~1.2,对草莓未开的花蕾侵染,从开花到T1代阳性植株,仅6个月,对比例从取叶片到开花结果得T1代阳性植株至少14个月,本发明缩短8个月。本发明的转化方法中包括浸花后的草莓种子的荧光检测、幼苗抗生素筛选及幼苗荧光检测阳性植株,对T1代植株催芽,长出胚芽的种子检测荧光初步判断阳性种子,再置于抗生素溶液浸湿的滤纸上生长,具有叶柄的小三叶植株时,再通过叶片颜色判断阳性植株,后通过荧光验证阳性植株。 | ||
搜索关键词: | 阳性植株 渗透液 草莓 根癌农杆菌介导 稳定遗传 荧光检测 植株 荧光 幼苗 转化 简易 胚芽 叶柄 抗生素溶液 抗生素筛选 植物生物学 浸湿 草莓种子 单克隆菌 叶片颜色 种子检测 花蕾 混合液 催芽 滤纸 侵染 叶片 开花 验证 生长 | ||
【主权项】:
1.一种渗透液,以水为溶剂,包括以下的组分:MS培养基1.5~2.5g/L,蔗糖40~60g/L,Triton X‑100 300~500μL/L,Silwet L‑77 300~500μL/L,6‑苄氨基腺嘌呤15~100μg/L,吲哚丁酸2~10μg/L和乙酰丁香酮200~400mg/L;所述渗透液的pH值为5.0~6.5。
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