[发明专利]一种脂蛋白(a)的制备方法在审
申请号: | 201811487639.1 | 申请日: | 2018-12-06 |
公开(公告)号: | CN109485715A | 公开(公告)日: | 2019-03-19 |
发明(设计)人: | 张波;刘振国;郝树彬 | 申请(专利权)人: | 潍坊泽成生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C07K1/30 |
代理公司: | 北京中索知识产权代理有限公司 11640 | 代理人: | 宋涛 |
地址: | 261061 山东省潍坊市高新区清池街道东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明适用于生物检测技术领域,提供了一种脂蛋白(a)的制备方法,包括如下步骤:向血清中加入大分子化合物和金属离子,混匀后离心,然后取一次沉淀;向一次沉淀中加入缓冲液,再加入金属离子进行搅拌溶解,溶解后进行离心,取上清液;向上清液中加入非选择性沉淀剂,反应完全后进行离心,然后取二次沉淀;向二次沉淀中加入缓冲液,然后加入金属离子,溶解沉淀,得到脂蛋白(a),再进行纯化。借此,本发明能够提高脂蛋白(a)的制备速率,制备成本低、时间短,纯化产物产出量高。 | ||
搜索关键词: | 脂蛋白 制备 金属离子 二次沉淀 一次沉淀 缓冲液 溶解 大分子化合物 生物检测技术 纯化产物 非选择性 搅拌溶解 取上清液 沉淀剂 血清 混匀 清液 沉淀 | ||
【主权项】:
1.一种脂蛋白(a)的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一 沉淀脂蛋白(a)向血清中加入大分子化合物和金属离子,所述大分子化合物的浓度为0.1~10%,然后混匀,混匀后离心,然后取一次沉淀;步骤二 沉淀的溶解向所述一次沉淀中加入缓冲液,所述缓冲液的浓度为0.01~0.1mol/L;再加入所述金属离子进行搅拌溶解,溶解后进行离心,然后取上清液;步骤三 化合物及金属离子的去除向所述上清液中加入非选择性沉淀剂,进行沉淀反应,所述非选择性沉淀剂的浓度为1.0~5.0%,所述非选择性沉淀剂的加入量为所述上清液体积的8~12%;反应完全后进行离心,然后取二次沉淀;向所述二次沉淀中加入所述缓冲液,然后加入所述金属离子,溶解沉淀,得到脂蛋白(a);步骤四 纯化脂蛋白(a)采用国家标准检测方法对所述脂蛋白(a)进行纯化,并计算纯化产出量。
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